基于HPLC-ELSD法的银柴胡中甾醇类成分含量测定
2021-09-10王秀芬方光明马学琴
王秀芬,李 静,方光明,马学琴
(1.宁夏职业技术学院,银川 750021;2.宁夏医科大学,银川 750001)
1 仪器与试药
1.1仪器 1220型高效液相色谱仪,1260B型蒸发光散射检测器(美国安捷伦公司);CPA225D型电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司);XPE26型百万分之一电子分析天平(瑞士METTLER TOLEDO公司);YER-201D型旋转蒸发器(巩义市予华仪器有限公司);FW135型中药粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司);15C4390型超声波清洗机(宁波新芝生物科技有限公司)。
1.2试药 本实验药材采自内蒙、陕西、甘肃和宁夏,经杭州医学院药学院生药室主任吴晓宁教授鉴定为石竹科植物StellariadichotomaL.var.lanceolataBge.的干燥根。α-菠甾醇(批号ZZS-20-106-A6,质量分数为97%)、豆甾-7-烯醇(批号3632-091A4,质量分数为97.5%),均购于上海甄准生物科技有限公司;甲醇、乙腈均为色谱纯(Fisher Chemical公司);水为娃哈哈纯净水。
2 方法与结果
2.1色谱条件 采用SHIMADZU Shim-pack GIST C18色谱柱 (250 mm×4.6 mm,5 μm);ELSD参数:载气流速为1.6 L·min-1;漂移管温度:70 ℃;喷雾器温度:30 ℃;流动相为甲醇-水(98∶2);流速:1.0 mL·min-1;进样量:50 μL。
2.2溶液的制备
2.2.1对照品溶液 精密称取α-菠甾醇对照品适量,置于25 mL量瓶中,加甲醇溶解,定容,制成质量浓度为0.215 mg·mL-1的α-菠甾醇对照品溶液;精密称取豆甾-7-烯醇对照品适量,置于50 mL量瓶中,加甲醇制成质量浓度为0.174 mg·mL-1的豆甾-7-烯醇对照品溶液。置于冰箱内冷藏。
2.2.2供试品溶液 精密称取银柴胡粉末(过3号筛)6.0 g,置于100 mL锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,摇匀,称定质量,超声(功率250 W,频率20 kHz)处理40 min,取出,放冷至室温,再称定质量,用甲醇补足减失的质量,摇匀,过滤,滤液用0.45 μm滤膜滤过,即得。
2.3系统适用性及专属性考察 分别精密吸取2.2项下制备的对照品溶液、供试品溶液和空白溶剂(甲醇)各50 μL,依照2.1项下色谱条件进样测定,记录色谱图,见图1。……
