殷 燕，张 晔，吴新然，霍孟可，蒋丽珠,

(1. 云南省第三人民医院，云南 昆明 650011；2. 大理大学临床医学院，云南 大理 671005)

阿尔茨海默病的发生与大脑萎缩性改变有关，这种改变会导致记忆缺失、认知功能障碍和突触损伤[1]。衰老、昼夜节律紊乱、Aβ积累和tau蛋白过度磷酸化、炎症反应、细胞凋亡、氧化应激、兴奋毒性等都能促进阿尔茨海默病的发展[2-4]，目前还没有确切阻止阿尔茨海默病进展的治疗方法。益智仁补脾补肾、固涩，具有益智健脑、强心、抗癌、抗衰老、镇静、镇痛等多种药理作用，且益智仁的不同化学成分对神经细胞有一定保护作用[5-7]。本实验采用脂多糖(LPS)诱导建立阿尔茨海默病炎症模型，从细胞、分子水平观察益智仁含药血清对LPS致小鼠小胶质细胞(BV2)损伤的保护作用，以研究益智仁在阿尔茨海默病防治中的可能作用机制，为临床更好地防治阿尔茨海默病提供实验基础。

1 实验材料与方法

1.1实验动物及细胞 健康SD大鼠20只，体重(230±20)g，购自昆明医科大学动物中心，动物合格证号(0012158)，饲养于清洁级动物室。实验前适应性饲养7 d，室温22～25 ℃，湿度50%～70%，灌胃过程中动物自由摄食和饮水。BV2细胞株购自中国科学院昆明细胞库。

1.2药物及主要试剂 益智仁药材成品颗粒购自三九药业有限公司。DMEM高糖培养基(Hyclone，SH30243.01B)；双抗(链霉素100 IU/mL 和青霉素100 IU/mL)、0.25%胰酶(millipore，SM-2003-C)；胎牛血清(Hyclone，SH30070.03)；MTT(美国 MP Biomedicals， Q2644)；DMSO(sigma， D2650-5X5ML)；肿瘤坏死因子-α (TNF-α)抗体(CST，11948S)；白细胞介素-1β(IL-1β)抗体(CST，83186S)；NF-κBp65抗体(CST，8242S)；Nitrate/Nitrite Assay Kit(碧云天，S0023)；Goat anti mouse IgG、Rabbit IgG antibody购自Gene Tex公司。

1.3细胞的体外培养与传代 BV2细胞接种于25 cm2细胞培养瓶中，置于37 ℃条件下5% CO2培养箱培养，2～3 d换液1次。细胞……