陈 滢,王 杰,赵 倩,倪倩倩,侯 超

(安徽医科大学1.护理学院、2.基础医学院、3.第一附属医院新生儿科，安徽 合肥 230032； 4.中国科学技术大学附属第一医院产科，安徽 合肥 230032)

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是常见的消化系统恶性肿瘤，在男性和女性最常被诊断出的癌症中分别位列第3位和第2位，也是全世界癌症死亡的第2大主要原因[1]。随着医学研究的发展，结直肠癌的治疗方法日趋多元化，外科切除配合放射、药物疗法、靶向治疗等不同综合治疗方法不断出现，但是患者预后仍未见显著变化，并且随着肿瘤耐药机制的产生，药物治疗效果变差，新的治疗方法亟待产生[2-3]。中脑新型胶质细胞源性神经营养因子(mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor，MANF)是一种内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ER stress)诱导的分泌性蛋白[4]，在多种ER应激相关疾病中具有保护作用[5-8]。MANF在炎症刺激下入核，与p65的DNA结合结构域结合，抑制NF-κB通路，发挥抗炎作用[9]。近期研究发现，SUMO1可以促进MANF的核转位，抑制NF-κB通路，发挥抑制肝癌的作用[10]。有研究表明NF-κB通路的激活也是结直肠癌的重要发病机制之一[11]，但目前尚无MANF在胃肠道肿瘤中相关作用的报道。故该实验拟通过在结直肠癌细胞系Caco-2中过表达MANF来研究其对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响，并探索可能的作用机制，为结直肠癌的治疗提供新型药物作用方案。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞株及质粒 细胞系Caco-2细胞购自武汉Procell公司；pEGFP-C2-MANF质粒与pEGFP-C2质粒为安徽医科大学沈玉先课题组惠赠；

1.1.2试剂 转染试剂jetprim buffer购自法国保利嘉公司；DMEM培养基(美国HyClone,批号 AE29431646)；TRIzol(美国Ambion,批号 190903)SYBR Green(日本TOYOBO,批号 9283373)；……