雷杰 王楠 牛群 谢贝 吴玲 邓丽 刘志辉 孟繁荣

广州市胸科医院肺部疾病研究所呼吸疾病国家重点实验室 510095

结核病作为一类慢性传染性疾病，主要是由结核杆菌感染，在全球范围内流行，严重危害人类健康。化学疗法［1］是治愈结核病和限制结核杆菌传播的重要手段，找到一种能够快速反映结核病化疗疗效的生物标志物，实现对化疗疗效效果的监控与评价显得十分重要。近些年来，随着现代医学技术的快速发展，各种新型标志物不断被发现，它们的高敏感性、高特异性和快速性给结核病的化疗监控带来新的期望，然而这些标志物大都不能满足临床上对结核病化疗监控的全部要求。mpt64 是结核杆菌在生长早期大量分泌的特异性蛋白，可分泌至菌体外。mpt64 mRNA产生于结核杆菌合成mpt64分泌蛋白时，由结核杆菌内的mpt64基因编码并生成，属于活菌体中极为重要的一个组成部分，同时mpt64 mRNA 有较短的半衰期，一般仅为数分钟。由此可见，mpt64 mRNA作为一种监控结核病化疗疗效的细菌学分子标志物将大有可为。本研究探讨mpt64 mRNA 作为结核化疗细菌学监控的分子标志物可行性。

1 资料与方法

1.1 菌株 2021 年1 月至4 月，于广州市胸科医院分枝杆菌菌种库中，随机选取35 株对4 种一线抗结核药物敏感的临床分离株。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂和仪器 Middlebrook 7H9、Middlebrook 7H10 培养基购自美国BD 公司，异烟肼购于瑞威尔生物科技有限公司，细菌总RNA 快速抽提试剂盒购自上海生工生物工程有限公司，反转录反应试剂盒（High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit）购自美国赛默飞世尔公司，实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测试剂盒（TB Green Fast qPCR Mix）购自北京宝日医生物技术有限公司。……