鲢腐败希瓦氏菌株的16S rRNA鉴定
2021-09-06刘群王菁刘桐山霍文慧冯守明
刘群,王菁,刘桐山,霍文慧,冯守明
(天津市动物疫病预防控制中心,天津300402)
鲢(Hypophthalmichthys molitrix)为我国著名四大家鱼之一,生长周期短,肉质鲜美,具有较高的经济价值,在我国被广泛养殖。随着高密度集约化养殖技术的进一步提高,放养密度不断增加,残饵、粪便等亦随之增多,加之水资源紧缺,水交换能力减弱,造成养殖水体富营养化,水质污染程度加剧,导致鲢病害频繁发生,死亡率逐年增高[1]。
目前已发现多种病害可对鲢产量和品质造成威胁,如细菌性败血症、鳃霉病、车轮虫病和指环虫病等。其中,细菌性败血症为鱼体感染革兰氏阴性菌造成的,其发病时间长,是鲢集约化养殖过程中危害较大的一类疫病[2]。文献[2-3]研究表明,该病主要由嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)、产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes)、苏伯利气单胞菌(Aeromonas sobria)、弧菌(Vibriospp.)等多种细菌感染引起。
现应用平板划线法对患病鲢进行细菌分离,对分离菌株进行革兰氏染色、16S rRNA序列鉴定及系统发育树分析,获得一株腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)。该研究结果可为鲢细菌性败血症潜在致病源的研究提供理论依据和参考。
1 研究方法
1.1 病鱼来源
于2021年3月初,在天津市宝坻区某淡水养殖水库取鲢病例样品。患病鲢为12月龄左右,体长为(40±5)cm,体质量为(1.2±0.4)kg。养殖水库水温2~4℃,日死亡率约3%。
1.2 观察病鱼
疾病暴发时,现场观察病鱼,了解养殖水温、鱼龄、发病率、死亡率等情况。
1.3 寄生虫检查
用常规显微镜检查病鱼体内外有无寄生虫。对其鳃丝、体表黏液采取水浸片法,肝、脾、肾组织采用压片法,血液用涂片法,制片后置于显微镜下观察发病鱼体表、鳃和其他内脏组织有无寄生虫。……
