沈吟芳，王 谦，郭凌川

骨髓活检是用一支特制的穿刺针在患者髂前上棘或髂后上棘处取出1.0～2.0 cm长、直径0.1～0.2 cm的圆柱形骨髓。骨髓富含钙盐、一定量的脂肪及少许纤维支架，具有组织小而硬、脆、松的特点，必须经过脱钙后才能进行石蜡包埋，制成骨髓切片。本实验经过长期实践，总结出一套骨髓标准化脱钙处理方法，操作安全简便，不仅制成了高质量的石蜡切片，而且在HE染色、网状纤维染色及免疫组化标记中，均取得了满意的效果，现将方法介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料收集2017年6月～2020年2月苏州大学附属第一医院血液科送至病理科的骨髓活检标本1 775例。

1.2 试剂固定液：35%～40%甲醛100 mL，无水磷酸氢二钠6.5 g，磷酸二氢钠4.0 g，蒸馏水900 mL；复合脱钙液：甲酸120 mL，36%～38%盐酸80 mL，蒸馏水800 mL。

1.3 方法(1)从患者体内穿刺出骨髓后立即放入固定液中密闭固定，固定液的用量是骨髓体积的5～10倍，送至病理科后固定12～24 h；(2)12～24 h后开始取材，骨髓组织迅速脱钙，在装满脱钙液的棕色玻璃瓶内，室温(20 ℃左右)避光密封脱钙1～3 h，脱钙液的用量是骨髓组织体积的30倍，完全脱钙的骨髓组织放入固定液中继续固定1～3 h，与其它常规标本一起进入全自动脱水机内，按工作日程序进行脱水、透明、浸蜡；(3)第3天开始石蜡包埋、切片、HE染色(切片厚2 μm[1])，镜下阅片，初步诊断；(4)第4天，根据初步诊断的需求，继续骨髓石蜡切片，切出3 μm厚[2]的切片，进行Gomori网状纤维染色；切出2 μm厚[1]的切片，操作步骤严格按免疫组化试剂盒说明书进行，DAB显色。

2 结果

骨髓石蜡切片完整无刀痕、光滑平整，厚薄均匀一致。……