六胺银滴染法在真菌检测中的应用

2021-09-06吴海波许璐璐王月娥王晓秋

临床与实验病理学杂志 2021年7期

王琦，吴海波，许璐璐，钟文，王月娥，王晓秋，顾萍

六胺银染色是特殊染色中常用的真菌检测方法之一，其敏感性高且能够清晰的显示真菌的形态，是组织病理学检测真菌的重要手段[1]。以往六胺银染色多采用高身5片立式染缸浸染法，但该方法浪费试剂，并且受染色缸清洁度的影响，易出现银镜反应和银沉淀污染[1-2]。本科室采用了一种滴染法，效果稳定，且可节省试剂，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料收集中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)2018年以来病理诊断为真菌感染的标本120例，其中鼻腔及鼻窦组织68例，肺部穿刺活检及手术标本35例，耳部及角膜组织15例，皮肤组织2例。所有标本均经10%中性福尔马林固定，常规脱水透明，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。六胺银染色试剂盒购自珠海贝索生物公司，成分包含高碘酸、六次甲基四胺银粉剂、硼砂溶液、硫代硫酸钠和伊红染液。使用前将六次甲基四胺银粉剂与硼砂溶液1 ∶1混合，彻底混匀试剂。

1.2 方法

1.2.1立式染缸浸染法将混匀后的六胺银工作液倒入立式染缸内，60 ℃加热30～60 min，终止染色后水洗，硫代硫酸钠染色2 min，伊红复染。

1.2.2滴染法将混匀后的六胺银工作液滴加到玻片上，完全覆盖组织，并将玻片置于湿盒内，放入恒温烤箱，65 ℃加热30～50 min，期间适时观察组织的颜色变化，待组织呈深黄色，镜下观察真菌呈黑褐色时，终止染色，水洗，硫代硫酸钠染色2 min，伊红复染(表1)。