娄 宁，杨 帆，王莉芝，蔡仁萍，解丽梅

肺癌是发病率和病死率最高的恶性肿瘤，近年来其发病率呈上升趋势，患者长期预后差，5年生存率不足20%[1-2]，大多数患者就诊时肿瘤已进展为中晚期，部分患者甚至发生远处转移，而肿瘤血管生成是肺癌浸润和转移的关键因素[3]。近年来发现肿瘤转移相关基因转录因子21(transcription factor 21, TCF21)参与多种恶性肿瘤的发生、发展和转移，如在结肠癌、肾癌等组织中作为潜在的抑癌基因通过抑制肿瘤血管生成发挥生物学作用[3-4]，然而其在肺癌中的作用机制尚未见报道。本实验通过分析肺腺癌组织中TCF21、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)表达与微血管密度(microvessel density, MVD)及预后的相关性，旨在对其致病机制、疾病预后等方面的研究提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料收集2016年1月～2017年12月山东第一医科大学附属莱钢医院病理科存档的91例肺腺癌及癌旁组织(距离肿瘤边缘>2 cm)，均经病理学明确诊断。纳入标准：(1)术前未接受任何治疗(过放、化疗、免疫治疗或靶向治疗)；(2)临床和病理资料保存完整；(3)未合并其他类型的恶性肿瘤。患者平均年龄62.1岁(范围37～79岁)；其中男性55例，女性36例；年龄≤60岁者41例，>60岁者50例。肿瘤直径≥3 cm者46例，<3 cm者45例。TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期34例，Ⅲ+Ⅳ期57例；有淋巴结转移者43例，无淋巴结转移者48例。所有标本的使用均经患者知情同意，本实验经山东第一医科大学附属莱钢医院伦理委员会批准。

1.2 免疫组化标本均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片，常规HE染色。免疫组化：确诊的肺腺癌石蜡标本，4 μm厚连续切片，65 ℃烤2.5 h，二甲苯脱蜡，梯度乙醇复水，待微波炉内的枸橼酸钠(pH 6.5)缓冲液沸腾后，抗原修复10 min，室温下复温。3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶活性，山羊血清封闭非特异性位点，加入一抗，4 ℃恒温过夜。用P……