刘 慧，马东慎，刘广珍，向臣希

乳腺癌为严重威胁女性生命健康的恶性肿瘤之一[1]。目前，随着肿瘤免疫治疗的发展，程序性死亡-配体1(programmed death-ligand 1, PD-L1)抑制剂对于难治性乳腺癌的疗效初现[2-3]。然而PD-L1的表达具有异质性和动态性[4]，乳腺癌中PD-L1的调控因素尚未明确。促癌因子莫洛尼病毒前病毒整合位点-1(proviral integration site of moloney virus-1, PIM-1)属于丝氨酸-苏氨酸激酶，在免疫系统调节中起重要作用[5]。研究表明PIM-1抑制剂能够促进三阴型乳腺癌细胞发生凋亡[6]，而PIM-1能否调控三阴型乳腺癌中PD-L1的表达尚未见文献报道。本文着重分析浸润性乳腺癌中PD-L1和PIM-1蛋白的表达及两者表达的相关性，并从细胞学水平初步证明PIM-1对PD-L1蛋白的调控作用。

1 材料与方法

1.1 材料收集2010～2016年徐州医科大学附属医院行根治性切除术且术后病理确诊为浸润性乳腺癌患者208例。所有标本均经10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋。根据病理学资料获得其分子亚型信息，其中Luminal A型43例，Luminal B型47例，HER-2过表达型42例，三阴型76例。按照常规方法制备组织芯片。

1.2 方法

1.2.1免疫组化 采用免疫组化SP法染色，试剂盒购自北京中杉金桥公司。PIM-1抗体(克隆号G11)购自美国Santa Cruz公司。PD-L1抗体(克隆号22C3)购自美国DAKO公司。免疫组化使用Ventana全自动免疫组化系统进行。PIM-1阳性定位于肿瘤细胞胞核，呈黄色或棕黄色染色，采用免疫组化评分(H-Score)量化PIM-1的表达水平，以中位H-Score作为Cut off值将病例分为PIM-1高表达组和低表达组[7]。PD-L1阳性定位于肿瘤细胞或浸润的淋巴细胞和巨噬细胞，呈黄色或棕黄色染色。以CPS法对肿瘤PD-L1表达水平进行评分：CPS评分=[(阳性肿瘤细胞+阳性淋巴细胞+阳性巨噬细胞)/活肿瘤细胞总数]×100，统计一个高倍视野下的所有细胞(不少于100个肿瘤细胞)，将CPS评分≥10的病例作为PD-L1阳性病例。……