顾园 常城 滕小军 黄耿 王品发

1鄂东医疗集团黄石市中心医院湖北理工学院附属医院消化内科435000；2鄂东医疗集团黄石市中心医院湖北理工学院附属医院泌尿外科435000

胃癌起源于胃黏膜上皮细胞，是全球最常见的消化系统恶性肿瘤之一，其发病率和病死率均较高［1］。胃癌的增殖和转移是导致患者预后较差的重要因素［2］。因而，探究胃癌的增殖和转移机制对胃癌的治疗具有重要临床意义。微小RNA（microRNA，miRNA，miR）是一种18～22个核苷酸的内源性非编码小分子RNA［3］。miRNA通过诱导形成靶基因mRNA的沉默复合体，在转录后水平调控基因的表达［4］。研究显示，miR-6783-3p在肺腺癌、肝癌中异常表达，与肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、化疗敏感性有关［5］。miR-6783-3p在胃癌中的表达和功能尚无文献报道。本研究旨在观察miR-6783-3p是否通过调节Ⅲ型纤维连接蛋白域 蛋 白1（fibronectin typeⅢdomain-containing protein 1，FNDC1）基因表达影响胃癌细胞的增殖和迁移能力。

1 材料与方法

1.1 细胞与主要试剂 胃癌细胞购于中国科学院上海细胞所；双荧光素酶报告基因检测试剂盒购于美国Promega公司；RPMI-1640培养基、胎牛血清购于美国Gibco公司；CCK-8试剂盒购于上海生工生物工程股份有限公司；实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）试剂盒、超敏电化学发光（ECL）试剂盒购于美国Thermo公司；Lipofectamine 3000转染试剂购于美国Invitrogen公司；一抗和辣根过氧化物酶标记的二抗购于美国CST公司；miR-6783-3p模拟物、阴性对照序列、FNDC1 mRNA 3’-UTR野生型（FNDC 1-WT）序列及FNDC1 mRNA 3’-UTR突变型（FNDC1-MT）序列购于上海吉玛有限公司。

1.2 细胞培养和转染 将BGC823细胞加入10%胎牛血清RPMI-1640培养基，于37℃、5% CO2饱和湿度培养箱中培养。收集对数生长期的BGC823细胞，按照Lipofectamine 3000转染试剂说明书，转染阴性对照序列（对照组）和miR-6783-3p模拟物（试验组）。……