庞金兰

（贵州省毕节市黔西县动物疫病预防控制中心 551500）

1 调查情况

1.1 发病情况

金兰镇一养牛户于2020年9月底从山东省临沂市购买5～18月龄鲁西黄牛129头，价值85万元，因长途运输受寒，加之气候、水土、草料不适，一周内65头肉牛发病，出现感冒、肺炎、肠炎等病混合感染，已死亡2头。

1.2 临床症状

病牛咳嗽、鼻孔一侧或两侧流浓鼻液、眼部少量分泌物，部分牛体温升高、食欲不振、流涎。

1.3 病理变化

病理变化主要集中在肺部与胸腔。肺和胸膜轻度粘连，肺脏实变，呈菜花样，切面呈大理石样，有不规则坏死病灶；胸腔积液；心包积液；肾脏水肿；脑内积液，有脓性液体在脑右侧。

1.4 采样

采集1头患病牛病变肺组织、肺门淋巴结、胸腔积液、心包积液各1份。

2 实验室诊断

2.1 牛传染性胸膜肺炎病原核酸检测

取病变肺组织与肺门淋巴结无菌研磨成匀浆后，与胸腔积液及心包积液反复冻融以用SDS-Protein K法提取DNA，以针对牛传染性胸膜肺炎病原特异性引物SC1/SC2，对上述DNA样本进行PCR扩增[1]，结果见图1。

由图1可知，未从送检胸腔积液、心包积液、肺组织与肺门淋巴结中以牛传染性胸膜肺炎病原特异性引物SC1/SC2未扩增到277bp目的条带，牛传染性胸膜肺炎病原核酸检出率为0（0/4），表明该牛未患牛传染性胸膜肺炎[2]。

图1 PCR核酸检测结果

2.2 牛支原体肺炎病原核酸检测

取病变肺组织与肺门淋巴结无菌研磨成匀浆后，与胸腔积液及心包积液反复冻融以用SDS-Protein K法提取DNA，以针对牛支原体肺炎病原通用引物16SP1/16SP2，对上述DNA样本进行PCR扩增，结果见图2。……