李雪松 周迎春 李婳婳 李溪

(1广州中医药大学第一临床医学院，广东 广州 510405；2广州中医药大学第一附属医院)

国家癌症中心发布的2015年统计数据显示，当今肺癌发病率与死亡率均居我国恶性肿瘤的首位〔1〕，其中非小细胞肺癌占临床肺癌患者的80%～90%。由于早期诊断困难，且缺乏有效的治疗措施，癌症患者总体预后较差。益气除痰方是由广州中医药大学第一附属医院肿瘤科所创制的治疗肺癌的经验方，前期研究表明，益气除痰方在临床治疗中具有良好疗效〔2，3〕。近年来，基于免疫细胞在恶性肿瘤治疗方面的巨大潜力，免疫细胞过继疗法已成为继手术、放疗和化疗之外的一种新的治疗方法〔4〕。同时，传统中医药联合细胞治疗的方法也被越来越多的实验研究所证实。本文拟探究益气除痰方联合细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肺腺癌A549细胞生长的影响。

1 资料与方法

1.1细胞株 人源性肺腺癌A549细胞由广州中医药大学第一附属医院肿瘤科惠赠。A549细胞中加入含10%胎牛血清(FBS)RPMI1640培养基，置于37℃、5%CO2培养箱饱和湿度下培养、传代，待细胞呈贴壁生长，于细胞对数生长期开始实验。

1.2药物 西洋参、法半夏、浙贝、山慈菇、茯苓等均购自广州中医药大学第一附属医院中药房，经鉴定均为正品。

1.3动物 SPF及SD雌性大鼠20只，体重200～220 g，由广东省实验动物中心提供，许可证号：SCXK(粤)2008-0020。

1.4主要试剂 DMEM高糖培养基(Thermo公司，批号：NZ3422)，RPMI1640(Gibco公司，批号：D6429)，FBS(Corning公司，批号：C11875)，磷酸盐缓冲液(PBS，Corning公司，批号：210-040-cvc)，青链霉素(Penicillin G/sterptomycin，Gibco公司，批号：FBSSA500-S)，重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激……