黄文强，张志刚，郑 玲，辛雪梅，彭大新

(1.扬州大学兽医学院，江苏扬州 225000；2.上海东方希望集团上海畜牧有限公司，上海 200000)

猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种高致死性、接触性传染病[1-3]，其发病特征以呕吐、腹泻、脱水、电解质紊乱为主，各种年龄阶段和不同品种的猪群都有易感性，且对哺乳仔猪、架子猪或育肥猪的危害更大[4]，尤其是哺乳仔猪受害最为严重，发病率高达100%，病死率为30%～80%[5]。

PEDV的形态是典型的冠状病毒形态[6]，形态学呈现多形性，近似于球形，病毒的外部有囊膜，囊膜上有纤突，纤突之间的间距较大，并且排列比较规范，呈花瓣样放射状，纤突的长度约为20 nm左右，PEDV粒子的大小为95 nm～190 nm，平均直径为130 nm。核酸为线性单股正链RNA[7]，其表面具有3种结构蛋白，即纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和包膜蛋白(E)[8]。其中M蛋白位于PEDV的囊膜表面，是囊膜上含量最多的蛋白，在不同的PEDV毒株之间具有相对保守性，常常使用其作为建立PEDV的RT-PCR方法和流行病学的研究工具的靶基因[9]。

该病从2010年开始严重暴发流行，原有疫苗保护效果较差，提示可能存在变异株[10-13]。近年来PED流行范围不断扩大，呈现地方流行性，是严重威胁我国和全球生猪养殖的重要疫病。为了进一步研究该病原的致病性特征，加强对PED的防控，本研究从江苏省某猪场发生疫情的5日龄仔猪粪便和肠道中分离1株PEDV，以期为PEDV的致病机理研究和疫苗研制提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料与细胞 无菌采集江苏某猪场5日龄腹泻仔猪的小肠及内容物，置-80℃冰箱保存备用。……