细粒棘球绦虫TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
2021-08-31王冰洁班万里段兰利陈云英张壮志
中国人兽共患病学报 2021年8期
王冰洁,赵 莉,班万里,段兰利,陈云英,张壮志
囊型包虫病(CE)即细粒棘球蚴病,是由细粒棘球绦虫幼虫(棘球蚴)引起的一种慢性人兽共患病[1]。病变可使邻近器官组织萎缩及功能障碍,病变包囊一旦破裂,可引起过敏反应,甚至死亡,严重威胁了公共安全和畜牧业生产,影响社会经济发展[2]。鉴于该病的广泛流行和严重程度,世界卫生组织(WHO)将其作为17种被忽视的疾病之一纳入2020年战略路线图[3]。在我国,几乎所有省(直辖市、自治区)都有该病的报告,尤以新疆、宁夏、青海、甘肃、陕西、西藏、四川、云南、内蒙古等地区最为严重[4]。据统计,全国每年患包虫病的牛、羊在5 000万头(只)以上,造成的经济损失超过30亿元,推算患病人数为166 098例[4-5],包虫病仍是世界范围内引起家畜发病和死亡的重要原因之一。因此及时、准确地监测囊型包虫病,对控制该病的流行、综合防控措施的实施和防治效果的评价等都具有十分重要的意义。
目前,用于囊型包虫病的检测方法主要有4类,其中影像学检测是该病检测的首选,但难以区分病变包囊和肿瘤;病原学检测是确诊该病的经典方法,但对实验人员专业知识和技术要求较高;免疫学检测在早期检测中发挥重要作用,但无法避免假阳性结果[6-7];分子生物学检测是从基因水平对病原进行检测的方法,具有特异、敏感等优点,目前已用于包虫病特异基因筛选等方面的研究[8-9]。本研究以细粒棘球绦虫线粒体基因的特异性引物和探针建立起了用于囊型包虫病检测的荧光定量PCR方法,以便快速、准确的区分Eg,并将其应用于Eg的大规模监测。……
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