HIF-3在骨肉瘤组织中的表达及低氧状态对MG-63细胞侵袭能力的影响

2021-08-31盛奇智阮锋魏优秀李广磊刘平

生物骨科材料与临床研究 2021年4期

关键词：检测

盛奇智阮锋魏优秀李广磊刘平*

骨肉瘤是骨组织最常见的原发性实体恶性肿瘤，也是骨肿瘤患者的主要死亡原因之一[1-2]。骨肉瘤的恶性程度高、转移早，治疗后容易复发和转移，患者预后差，5年生存率相对较低。骨肉瘤的侵袭转移机制目前尚未完全阐明，仍然是当前研究的热点和难点。

目前大量研究表明，低氧微环境与人类恶性实体肿瘤关系非常密切[3-4]，肿瘤低氧环境是引起其侵袭转移的关键因素[5-6]。检测低氧微环境诱导的骨肉瘤细胞内相关基因的表达对阐明其侵袭转移的分子机制具有重要作用。肿瘤对低氧引起的反应主要是由转录因子低氧诱导因子（hypoxiainducible factor，HIF）家族介导的，HIF由功能性的亚基和结构组成性的亚基[7]2个亚基组成，亚基对氧敏感，对HIF功能的发挥起关键作用[8]。有研究报道在人体内发现HIF-3，在胰腺癌中，低氧诱导的HIF-3表达增强了胰腺癌细胞的侵袭转移能力[9-10]。本文以骨肉瘤组织和细胞株为研究对象，从细胞学实验角度确立HIF-3在骨肉瘤中的表达与侵袭转移的关系，探讨HIF-3在此关系中的作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

DMEM培养基（Gibco公司，美国）；胎牛血清（Gibco公司，美国）；-actin抗体（Proteintech公司，中国）；HIF-3抗体（Proteintech公司，中国）；HRP标记羊抗兔IgG（H+L）（Proteintech公司，中国）；FLAG-HIF-3质粒（ViGene公司，中国）；HIF-3及-actin引物合成（GENE公司，中国）；HiPerFect Transfection Reagent（Qiagen公司，美国）；Effectene Transfection Reagent（Qiagen公司，美国）；Oligofectamine Reagen（Invitrogen公司，美国）；HIF-3 siRNA（广州瑞博生物科技有限公司）。