姜莉莉，武海斌，宫庆涛，孙瑞红

（山东省果树研究所，山东泰安271000）

核桃（Juglans regia L.）为胡桃属多年生落叶乔木，因其果仁营养丰富，该树种在我国具有较高的经济价值和社会地位[1]。山东省是核桃主产区之一，种植面积近10 万hm2[2]。近年来，由于管理松懈、反常气候频率增加，核桃病虫害发生日益严重[3]。核桃炭疽病是危害核桃果实、导致落果、烂果的重要因素，发病率高达30%～50%，严重影响核桃产业健康发展[4]。该病由胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides 侵染引起，在核桃近成熟期发生，高温高湿条件可使病情加剧[5]。核桃干腐病是造成核桃减产的重要病害，病原菌为葡萄座腔菌属Botryosphaeria[6]。核桃叶斑病病原菌为链格孢属Alternaria[7]，可导致核桃叶片大面积枯黄，降低核桃结实量和果实饱满度。

植物体微生物多样性受环境因素、生理条件等多种因素影响[8]。高通量测序技术能够获得更加真实的植物微生物群落的分类和功能信息，揭示病原菌与植物间的互作关系[9]。本研究采用高通量测序技术分析核桃炭疽病病果与健果青皮的微生物多样性，以期为病害的科学防治提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 样品采集

2020年8月27日，于山东省济南市历城区高尔镇核桃园村（117°5′22"E，36°11′17"N），从15年生“香玲” 核桃树采集核桃炭疽病果和健果各20 枚。以75%酒精擦拭果实青皮表面，干冰保存并送样。

1.2 测序分析

核桃青皮微生物多样性分析由北京诺禾致源科技股份有限公司代理完成。

采用CTAB 法对样本的基因组DNA 进行提取，以琼脂糖凝胶电泳检测DNA 的纯度和浓度，以无菌水稀释样本至1 ng/μL。……