白杨素对HBx诱导肝癌细胞增殖、凋亡及miR-103/PTEN通路的影响
2021-08-24陈燕童天夫许立新田志明吴培
陈燕 童天夫 许立新 田志明 吴培
(东南大学附属中大医院 1江北院区检验科,江苏 南京 210044;2江北院区介入科;3感染科)
乙型肝炎病毒(HBV)持续感染是肝癌发生的主要因素〔1,2〕。HBV X蛋白(HBx)的反式激活对肝癌的发生发展有重要意义,但其致癌的分子机制尚不清楚〔3〕。临床化疗是治疗肝癌不可或缺的方法,但有毒副作用,且极易形成耐药性从而阻碍化疗药物持续发挥作用,中医药有天然、毒副作用小等优点,中医药治疗恶性肿瘤研究日益增多〔4,5〕,寻求疗效显著的中药治疗肝癌逐渐成为研究热点。白杨素是黄岑、南枣酸、木蝴蝶等许多中药的活性成分,研究显示白杨素可抑制小细胞肺癌〔6〕发生,但关于白杨素在抑制HBx诱导的肝癌生长研究较少。研究显示,磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)在肝癌发生发展中发挥重要作用,miR-103是PTEN的靶基因,李明等〔7〕研究显示,miR-103在肝癌癌组织中异常表达。本研究主要通过观察白杨素对转染HBx蛋白的肝癌细胞系HepG2增殖、凋亡变化,探讨白杨素对HBx-HepG2增殖、凋亡的影响及可能的作用途径,以期为肝癌的治疗提供新思路。
1 材料与方法
1.1实验材料、试剂及仪器 白杨素购自上海源叶生物科技有限公司(批号B20063-20 mg,纯度>98%);人肝癌细胞株HepG2购自中国科学院细胞库;携带HBx基因重组逆转录病毒由本室构建提供;Trizol、BCA提取试剂盒、荧光定量PCR试剂盒试剂、Hoechest33258荧光染色试剂盒、AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒均购自武汉默沙克生物科技有限公司;RPMI1640培养基购自武汉纯度生物技术有限公司;CCK-8实验相关试剂购自美国Promega公司;鼠……
