桂皮醛对关节炎大鼠JAK/STAT信号通路的作用机制研究①
2021-08-21武豪杰张明辉洪成智陈欣欣河南大学淮河医院骨科开封475001
武豪杰 张明辉 洪成智 李 遵 陈欣欣(河南大学淮河医院骨科,开封475001)
类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种全身慢性自身免疫性疾病,以滑膜炎、组织增生、血管翳形成和骨质损伤为典型特征,患者常有关节肿胀、疼痛、功能障碍甚至关节畸形等[1]。该病发病率及致残率高,严重影响患者的生存质量,临床治疗以药物、外科治疗、免疫和生物疗法为主,往往给患者带来沉重的经济负担[2]。肉桂(Cinnamomum cassiaPresl)是我国传统中药材,具有广泛的药理作用,也是一种常用的食品调味剂[3]。桂皮醛(Cinnamaldehyde,Cin)是肉桂的主要有效成分,多项研究证实Cin对RA具有治疗作用,但具体机制尚不清楚[4-6]。近年来,有研究报道JAK∕STAT信号通路的激活与关节炎多细胞因子水平升高相关,在关节炎的发病过程中起重要作用[7]。因此,本研究以JAK∕STAT信号通路为切入点,采用IL-1β诱导的MH7A人RA成纤维样滑膜细胞和Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,探究Cin对MH7A和CIA大鼠的作用及其相关分子机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞 人RA成纤维样滑膜细胞MH7A,购自上海中科院细胞库。细胞采用含有10%胎牛血清的RPMI1640培养基,在5%CO2、37℃、饱和湿度的细胞培养箱中培养。
1.1.2 动物SPF级SD大鼠40只,6周龄,体重180~220 g,雌雄各半,购自北京维通利华实验动物技术有限公司(许可证号:SCXK(京)2017-0011)。实验动物及饲养条件符合《实验动物管理条件》要求。
1.1.3 药品与试剂 桂皮醛(纯度>98%)购自上海一基实业有限公司;弗氏完全佐剂、牛Ⅱ型胶原蛋白购自碧云天生物技术有限公司;甲氨蝶呤(MTX,2.5 mg×100片)购自上海上药信谊药厂有限公司;RPMI1640培养基、胎牛血清、青链霉素混合液(100×)、胰蛋白酶-EDTA消化液、HE染色试剂盒、CCK-8试剂盒、RIPA裂解液、PMSF、脱脂奶粉、ECL发光液、PVDF转印膜购自北京索莱宝科技有限公司;……
