曾 静 熊 庆 张丽丽 袁 娟 何 莹 邱黎菲（都江堰市人民医院医疗美容科，都江堰611830）

成纤维细胞生长因子21（fibroblast growth factor 21，FGF21）属于FGF基因家族，主要分布于肝脏、胰腺、脂肪等组织，在糖脂代谢、胰岛素抵抗、胚胎发育等过程中发挥重要作用［1-3］。近年来，FGF21的抗纤维化作用在肾脏、胰腺、心脏等器官中得到证实，但是其是否能够缓解皮肤瘢痕的纤维增生尚未见报道［4-7］。

皮肤角质层是大分子蛋白的天然屏障，而且皮肤瘢痕中高度增厚的真皮也是FGF21难以有效发挥作用的障碍［8］。SPACE（skin penetrating and cell entering）肽作为一种皮肤穿透肽，已成功用于小干扰RNA、链霉亲和素、透明质酸等物质的皮肤递送，在载药透皮中具有广阔的应用价值［9-10］。

本实验在FGF21的下游引入SPACE编码序列，构建pET-28a-FGF21-SPACE质粒，使用大肠杆菌表达系统获得FGF21-SPACE重组蛋白，并制备相应的卡波姆凝胶制剂。随后建立博来霉素诱导小鼠皮肤瘢痕模型，考察该模型下FGF21-SPACE的透皮能力及对皮肤形态结构、血管生成、纤维化因子表达的影响，从动物模型的角度初步验证FGF21-SPACE对皮肤瘢痕形成的抑制作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物SPF级健康雌性的C57BL∕6小鼠，7～8周龄，体重（23±3）g，购自上海斯莱克实验动物有限公司。饲养温度：（25±2）℃，相对湿度：50%～60%，分笼饲养，自然光照射，自由饮食和进水，饲养1周适应新环境后再进行实验。

1.1.2 主要试剂和仪器IPTG、博来霉素购自美国Sigma公司；Ni-agarose亲和层析柱购自美国GE公司；抗FGF21抗体购自美国Santa Cruz公司；其余一抗抗体购自英国Abcam公司；二抗购自武汉三鹰生物技术有限公司；卡波姆980购自青岛天力源生物科技有限公司。……