蒋 慧 邵乐健 杨树坤 宋 瑞（皖北煤电集团总医院呼吸内科，宿州234000）

肺癌是全球范围内发病率较高和死亡速度较快的原发性恶性肿瘤，严重威胁人类生命和身体健康［1-2］。非小细胞肺癌约占肺癌的80%，包括鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌，癌细胞生长分裂较快，且扩散转移较早［3］。非小细胞肺癌早期症状为发热、咳嗽、胸痛等，多数患者因以上初期症状被误诊，约75%患者发现时已处于中晚期，错过了最佳治疗时机［4］。非小细胞肺癌临床治疗方法以手术为主，以放化疗、中药治疗为辅，但患者生存率仍然较低。靶向治疗逐渐成为研究热点，为非小细胞肺癌治疗提供了新思路。miR-1204异常表达与肿瘤发生发展密切相关。DEK蛋白是高度保守的转录调控因子，被确认为是一种癌基因，其过表达已被证实与多种人类恶性肿瘤相关，可作为肿瘤治疗靶点［5］。本文旨在研究miR-1204靶向调控DEK蛋白对非小细胞肺癌细胞凋亡的影响及作用机制，为非小细胞肺癌靶向治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料 人非小细胞肺癌细胞株（中国医学科学院肿瘤细胞库）；兔抗大鼠Bak抗体（Invitrogen公司）；大鼠抗小鼠Bcl-2抗体（Dako公司）；兔抗小鼠caspase-7抗体（Selleck公司）；兔抗人DEK抗体（武汉博士德生物）；BCA蛋白定量试剂盒、MTT试剂盒（天根生化）；磷酸盐缓冲液、胎牛血清、DMSO（北京中杉金桥）。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养及分组 采用含10%胎牛血清的培养液培养人非小细胞肺癌细胞株，培养条件为37℃、5%CO2，85%融合时传代。

1.2.2 慢病毒载体构建及分组 根据质粒特点设计miR-1204引物序列，引入SacⅠ酶切……