间充质干细胞外泌体通过抑制COX-2和NF-κB激活及p38 MAPK磷酸化缓解小鼠溃疡性结肠炎①
2021-08-21刘继攀李凤丹赵学影哈励逊国际和平医院衡水053000
刘继攀 孙 伟 宋 默 李凤丹 赵学影(哈励逊国际和平医院,衡水053000)
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种发病率较高的慢性非特异性肠道疾病,长期反复发病于直肠和结肠,主要病理表现为肠道炎症和溃疡,主要症状为腹泻、腹痛、血便等。UC发病率逐年上升,且被认为是导致结肠癌的主要原因之一[1]。UC的发病机制尚未明确,多被认为与炎症、感染、肠道菌群、遗传等因素有关,临床上UC无法根治,主要以抗炎、调节菌群等为主要治疗手段[2-3]。因此寻找有效的UC治疗方法非常重要。近年干细胞疗法逐渐用于各种不可逆损伤性疾病治疗,研究表明间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可能用于UC临床治疗,但移植数量、并发症预防、治疗长效性等问题仍然阻碍其临床应用[4]。外泌体是一类由多种活细胞分泌的30~100 nm的胞外囊泡,可携带多种宿主细胞遗传信息[5]。研究表明,MSCs外泌体可用于多种疾病治疗且副反应较少[6],但MSCs外泌体在UC中的应用尚未有明确报道,本研究探究MSCs对UC的影响及机制,旨在为UC治疗提供新思路。
1 材料与方法
1.1 材料SPF级4周龄C57BL/6雌性小鼠30只(河北省实验动物中心),许可证号:SCXK(冀)2018-0010,体重15 g;CD79、CD90、CD11B、CD45检测抗体(福麦斯生物技术有限公司);CD9、CD63、TSG101抗体(南京凯基生物技术有限公司);COX-2、NF-κB、P-p38 MAPK、p38 MAPK、GAPDH抗体(沈阳万类生物技术有限公司);流式细胞仪(Beckman公司);葡聚糖硫酸钠(DSS,美国MPBiomedicals公司)。
1.2 方法
1.2.1 MSCs分离与鉴定4周龄C57BL/6小鼠颈椎脱臼处死,酒精消毒,解剖取股骨和胫骨,剪去两端,含10%胎牛血清的原代细胞培养液反复冲洗骨髓腔3次,打散冲洗出的骨髓腔内细胞,所得细胞团块用70 μm细胞筛过滤除去细胞团块。……
