朱景茹,洪银洁,黄婉仪,张 斐,涂文玲,杨宗保,甘慧娟*

(1.福建中医药大学中医证基地,福州 350122;2.福建中医药大学针灸学院,福州 350122;3.厦门大学中医系,福建 厦门 361102)

慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)是临床常见的胃癌前期疾病,可见胃黏膜组织病理萎缩、变薄,是“炎癌转化”的关键环节[1]。大量临床研究证实,柴芍六君汤对CAG患者有显著疗效,可以确切改善胃脘部不适症状,逆转病理萎缩,促进疾病向愈[2-4]。然而,柴芍六君汤防治CAG的整体调节机制尚未得到充分揭示,因此,有必要从分子生物学角度深入研究柴芍六君汤对肝郁脾虚型CAG大鼠胃黏膜细胞增殖、凋亡的影响,为中药防治CAG、阻断其向胃癌进展的临床应用提供科学实验依据。

1 材料和方法

1.1 实验动物

清洁级SD大鼠,8周龄,26只,雌雄各半,体重(200±20)g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司[SCXK(沪)2019-0005]。大鼠群养于垫玉米芯的饲料笼中,垫料4 d更换1次,雌雄分笼饲养,控制室温21℃~23℃,相对湿度50%,自由摄食饮水,在厦门大学动物实验中心[SYXK(闽)2018-0009]适应性喂养7 d后进行分组实验。本实验经厦门大学实验动物管理伦理委员会批准(XMULAC20190142),实验过程严格遵循3R原则。

1.2 主要试剂与仪器

脱氧胆酸钠(批号:20190901,北京奥博星生物技术);25%~28%氨水(批号:C10586777,上海百舜生物科技);维酶素片(批号:20190405,乐普恒久远药业);HE染色试剂盒(批号:J19S11Y125305,上海源叶生物科技);逆转录试剂盒(批号:AJ52623A,日本TaKaRa公司);PCNA抗体(货号:24036,美国Proteintech公司);Ag-NOR染色液(货号:G2015,北京索莱宝科技);TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(货号:C1088,上海碧云天生物技术);基因扩增仪、荧光定量PCR仪(美国Applied Biosystems公司);正置荧光显微镜(德国Carl Zeiss公司);半自动切片机(德国Leica公司)。……