李洪刚，陈健，向鹏宇

（重庆市涪陵食品药品检验所，重庆 408000）

0 引言

复方木香小檗碱片是由盐酸小檗碱、木香和吴茱萸3味中药制成的，用于治疗肠道感染、腹泻。作为方中主药的木香未作定量要求，不能有效的控制该制剂的质量。通过实验，建立该制剂的含量测定方法[1-2]。 该方法精密度好，结果准确，可用于于复方木香小檗碱片的质量控制。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪（安捷伦1260），Sartorius-ME235S电子天平；木香烃内酯（对照品由中检院提供，批号111524-201911，含量99.9%），去氢木香内酯（对照品由中检院提供，批号111525-201912，含量99.8%）；复方木香小檗碱片（样品由远大医药公司提供，批号分别为2020801，2020901，2020904）。甲醇为进口HPLC级别，水为屈臣氏蒸馏水，其余试剂为优级纯级别。

2 方法与结果

2.1 色谱条件。Thermo-C18（250 mm×4.6 mm，5μm）作为色谱柱；以水-甲醇（25:75）作为流动相；流动相为1.0 mL/min；选取225 nm作为检测波长；柱温设置为35℃，进样量：10μL。

2.2 溶液制备

2.2.1 精密称取对照品适量，加甲醇制成每1 mL含木香烃内酯对照品和去氢木香内酯对照品20 ng的溶液，即得对照品溶液。

2.2.2 取本品20片，研细，取约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，超声处理（功率300 W，频率45 kHz）30 min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液[3]。

2.2.3 按复方木香小檗碱片剂制备工艺，取除木香外的其余药味，按照工艺要求制成不含木香的复方木香小檗碱片，按照2.2.2项下的操作方法制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察。专属性考察，取2.2项下3种溶液，依照2.1色谱条件进行测定。结果供试品溶液与对照品溶液在相同时间内有色谱峰出现，而阴性对照品溶液在此处未出现色谱峰，表明该方法专属性良好，见图1。

图1 高效液相色谱图

2.3.1 线性关系考察：取2.2项下的母液对照品溶液，分别精密量取1，5，10，15，20 mL，分别定容于100量瓶中，按2.1项下色谱条件测定，进行线性回归，得回归方程为：木香烃内酯对照品Y=14561X+1.4558，r=0.9992；质量浓度在10.13~200.26μg•mL-1范围内线性关系良好。去氢木香内酯对照品Y=18911X+43.213，r=0.9991，进样量在10.36~200.72μg•mL-1范围内线性关系良好。

2.3.2 精密度考察：取混合对照品溶液，连续测定6次，结果木香烃内酯的峰面积的RSD为0.24%（n=6），去氢木香内酯的峰面积的RSD为0.36%（n=6）。

2.3.3 重复性考察：取同一批号样品（批号为20200904）6份，按2.2.2项下要求进行制样，分别测定，结果木香烃内酯的峰面积的RSD为0.32%（n=6），去氢木香内酯的峰面积的RSD为0.26%（n=6）[4]。

2.3.4 稳定性考察：取同一批号样品（批号为20200904）溶液，分别在0、2、4、8、12、24 h进样10μL，考察其稳定性，结果木香烃内酯的峰面积的RSD为0.36%（n=6），去氢木香内酯的峰面积的RSD为0.37%（n=6）。

2.3.5 加样回收试验：精密称取样品（批号20200904）6份，精密加入2.2.1的对照品适量，按2.2.2项下要求制样并依法测定，回收率结果见表1。

表1 加样回收实验结果（n=6）

2.4 样品测定。取3批复方木香小檗碱片样品，按2.1项下色谱条件测定，进样量10μL，记录峰面积，计算各供试品中木香烃内酯、去氢木香内酯的含量，结果分别为：1.0088和0.4285 mg/g；1.1214和0.4322 mg/g；1.0127和0.4312 mg/g。

3 讨论

木香烃内酯对照品和去氢木香内酯对照品易溶于甲醇、乙醇等有机溶剂，因此在提取分离条件的摸索过程中，比较了不同超声时间对成分提取率的影响，分别选取了了超声 15、30、45、60 min后进行含量考察，通过考察，在超声30 min后，指标成分就能充分提取[5-6]。