杨文刚 周玉东 盛 涛 张九歌

(1.新疆兵团第七师胡杨河市畜牧兽医站，新疆 奎屯 833200；2.新疆农业大学动物医学学院，新疆 乌鲁木齐 830000)

面对当前严峻的动物疫病防控形势,消毒能有效杀灭病原体,切断动物疫病传播途径。但在实际的养殖生产中,养殖场一味地开展消毒工作，往往忽略消毒后病原菌存在状况，极易造成疫病的传播。笔者选取新疆奎屯垦区2个规模奶牛养殖场，通过采集牧场消毒通道、犊牛舍、产房、挤奶厅、养殖圈舍等消毒后环境样品，以实验室PCR检测为手段，筛查消毒后牧场饲养环境中存在的感染病原菌，为牧场降低疫病传播风险，指导有效开展消毒工作提供参考。

1.检测情况

1.1 检测样品：2020年12月17日到21日期间，按牧场消毒程序消毒后，采集检测2个集约化牧场环境样共41例样品。

1.2 仪器、试剂：荧光定量PCR仪（Gentier 96E）、牛奶致病菌DNA提取试剂盒（深圳易瑞，批号：20090801，规格50T）、16联牛乳腺炎病原菌核酸检测试剂盒（深圳易瑞，批号：20072001，规格50份/盒）、1.5ml离心管。

1.3 实验方法

1.3.1 样本DNA提取：采用牛奶致病菌提取试剂盒提取DNA，依照说明书操作进行提取。

1.3.2 荧光PCR检测：采用16联牛乳腺炎病原菌核酸检测试剂盒，依照说明书操作进行检测。

2.检测结果

检测结果：整体检测过程阴/阳对照结果符合试剂盒要求，根据PCR实验文件Text结果文档导出Excel格式结果，使用软件分析数据后结果见表一、表二。

表1 集约化1牧场24例样本统计

5 - - - - - - ±犊牛舍6-++-±--++7 - + - + - - ±8-++-± - -±9±++-- - -++10+±+----11+± ++ -±±12 + + - + - - ±13 + - + + - - ±14-± -- - -±产房15 - - - - - - -16 - - - - - - -17 - - - - - - -18---±---19 + - + + - - ±消毒间20 + + - + - + ±21 - + - + - + +22 - + - + - - +23---±--+24-+ -+ -±+阳性：++，弱阳性：+，疑似阳性：±，阴性：-（符号对应的Ct值详见说明书）奶牛舍

检测结果表明，集约化1牧场24例样本中共检出酵母菌9例，大肠杆菌9例，葡萄球菌属6例，肠球菌属6例，β-内酰胺酶抗性基因4例，化脓隐秘杆菌2例。……