高生智，潘永红*，梁 斌，詹 芳，史万贵，李有全

（1.甘肃省动物疫病预防控制中心，甘肃 兰州 730030；2.中国农业科学院 兰州兽医研究所，甘肃 兰州 730030）

2019—2020年甘肃省部分地区的羊只出现了以贫血、高热、消瘦、出血和体表淋巴结肿大为主要特征的临床症状，呈点状散发，属地方性动物疫病，初步怀疑为羊泰勒虫病。为进一步了解临潭县、永靖县、华池县、榆中县等地区羊泰勒虫病病原感染情况，于2020年3—5月对以上4个县患病羊只进行了羊耳尖血涂片，并采集羊血液，一一对应编号，带回实验室进行血液涂片染色镜检和羊泰勒虫PCR检测。对镜检有典型虫体、有疑似虫体和部分镜检阴性血液涂片对应的全血样品进行羊泰勒虫PCR检测，结果表明：永靖县、榆中县、临潭县的羊泰勒虫病是吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫的混合感染，而华池县羊泰勒虫病是单一的尤氏泰勒虫感染，证实了临床怀疑诊断。现将试验总结如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血片 来自临潭县、永靖县、华池县、榆中县，每县90张。于羊耳尖采血推制血片，自然风干，甲醇固定，吉姆萨染色。

1.1.2 全血 来自临潭县、永靖县、华池县、榆中县，每县90份。于羊颈静脉采血，摇匀，带回实验室冻存待检。

1.1.3 血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒购自天根公司，批号20200618。

1.1.4 普通PCR试剂 引物两对，尤氏引物、吕氏引物；DNA聚合酶（premix Tap），DEPC水，dNTP，标准DNA（Marker），上样缓冲液，1%琼脂糖凝胶，常规电泳液。

1.1.5 移液器和枪头 2 μl、10 μl、50 μl、100 μl、200 μl、1 000 μl单道移液器，高压灭菌配套枪头。

1.1.6 其他 显微镜、生物安全柜、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统。

1.2 方法

1.2.1 血片 常规显微镜镜检。……