周 洲，李世凯，赵 飞，陈飞雄，孔 杰

(贵州省农业科学院 水产研究所，贵州 贵阳 550025)

【研究意义】精子超低温冷冻保存技术对物种遗传种质资源保护及苗种生产都具有重要价值。【前人研究进展】目前鱼类精子超低温冷冻保存研究已在日本鲟(Charybdisjaponica)[1]、褐鳟鱼(Caspianbrowntrout)[2]、花鲈(Lateolabraxmaculatus)[3]、虹鳟鱼(Oncorhynchusmykiss)[4]、大西洋鲑(Salmosalar)[5]、大黄鱼(Pseudosciaenacrocea)[6]、真鲷(Pagrosomusmajor)[7]等200多种海淡水鱼类中有报道。国内外对鲟鱼类精子冷冻保存技术开展较多研究的有中华鲟、西伯利亚鲟、史氏鲟、俄罗斯鲟等[8-11]。【本研究切入点】贵州自2012年实现鲟鱼全人工繁育以来，受到雌雄鱼性腺成熟不同步或地理分布不同产生的生殖隔离导致鲟鱼繁殖成功率不高。因此，有必要开展贵州鲟鱼精子冷冻保存研究，以提高人工繁殖技术及保存优质良种资源。抗冻剂是影响精子冷冻保存的重要因素[12-13]，但有关抗冻剂对贵州鲟鱼精子冷冻保存效果研究未见报道。【拟解决的关键问题】研究不同抗冻剂对西伯利亚鲟精子的冷冻保存效果，以期筛选出合适贵州鲟鱼精子的超低温冷冻保存抗冻剂。

1 材料与方法

1.1 精子采集及活力检测

1.1.1 精子采集 2019年4-5月，在贵州省水产研究所惠水养殖基地选取性腺发育成熟的鲟雄鱼[体长(1.42±0.25)m、体重(15.8±3.5)kg]进行人工催产。精子采集时用干净的干毛巾擦去体表和生殖孔周围的水分及污物，用生理盐水洗净的塑料软管轻轻插入生殖孔，用手轻轻挤压腹部使精液自然流出经导管流入干净干燥的50 mL离心管中，放置于4 ℃的冰盒中备用。

1.1.2 精子活力检测 用过滤井水稀释激活后的精子，在200倍显微镜下观察精子的运动情况，并通过计算机辅助精子分析系统采集相关数据。……