孙银玲 陈丽艳 张蕾 王萍 綦菲 曹阳 王伟明*

1.黑龙江省中医药科学院，黑龙江 哈尔滨 150036

2.黑龙江护理高等专科学校，黑龙江 哈尔滨 150080

骨质疏松症(osteoporosis，OP)是以骨量减少、骨组织微结构破坏为特征的全身代谢性骨病，可导致骨脆性和骨折风险增加[1]。2018年国家卫生健康委员会对骨质疏松进行首次全国流行病学调查，结果显示65岁以上老年人群骨质疏松患病率高达32%[2]。因为潜在的破坏性结果和高的骨折累计率，骨质疏松症很大程度关系到社会老龄化问题[1，3]。

黄瓜籽又名哈力苏，为葫芦科植物黄瓜(Cucumis sativus L.)的种子[4]。《中华本草》中记载其具有续筋接骨、祛风、消痰的功效，主治骨折筋伤、风湿痹痛、老年痰喘等症[5]，在民间用于治疗骨质疏松症也具有悠久的应用历史。现代研究显示黄瓜籽具有补钙、壮骨、抗疲劳等多种功效，可药食兼用而备受青睐[3]。本研究通过考察黄瓜籽总皂苷提取物(cucumber seed saponins，CSS)对小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化的作用，以及对SPARC、OPG/RANKL/RANK信号通路mRNA和蛋白表达的影响，从细胞学水平探讨黄瓜籽总皂苷促进骨形成的作用机制，为其防治骨质疏松症的应用提供依据。

1 材料和方法

1.1 细胞株和主要试剂

小鼠颅顶前成骨细胞MC3T3-E1(subclone 14)购于中国科学院细胞库(货号：GNM15)；α-MEM培养基(HyClone，Cat. No. SH30265.01B)，胎牛血清(四季青，低内毒素)，0.25% Trypsin-EDTA(HyClone)；ALP活性检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；兔多克隆抗体SPARC(ab203284)、兔多克隆抗体OPG(ab9986)、兔单克隆抗体RANKL(ab124797)及兔多克隆抗体β-actin(ab8227)(Abcam公司)；辣根酶标记抗兔二抗(北京中杉金桥生物技术有限公司)；DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)；……