钱发聪，李梦娇，张廷金，闫春丽，付玲芳，李秀军，饶清琳*

(1.云南省烟草公司昆明市公司 嵩明分公司，云南 嵩明 651700；2.云南省烟草公司昆明市公司 寻甸分公司，云南 寻甸 655299；3.云南绿戎生物产业开发股份有限公司，云南 昆明 650000；4.昆明保腾生化技术有限公司，云南 昆明 650106)

烟草赤星病(Alternariaalternata)是发生在烟草中后期危害烟叶的真菌性病害[1-2]，该病原属于半知菌亚门的丝孢纲丝孢目的链格孢属[3]．自1892年美国首次报道[4-5]以来，该病害多次给世界烟草行业造成巨大的经济损失．目前，烟草赤星病在昆明烟区呈现日趋严重的态势[6]，由于该病感染导致烟叶等级下降1～2级[7]，对烟叶经济价值影响巨大．因此，对烟草赤星病的防治需要像烟草病毒病、黑胫病一样高度重视．而生态环保是未来烟叶生产的必然趋势，以生物菌剂替代化学药剂已成为烟草绿色防控的研究热点．

木霉菌通过空间竞争、营养竞争、重寄生、分泌抗菌物质等途径抑制或杀灭病原菌[8-11]，现已成为烟草病害生物防控报道较多的一种生防真菌[9-17]．王革等[9]研究表明，木霉菌能附着、缠绕于赤星病病菌菌丝上，并产生吸器侵入菌丝，同时还会分泌使该病菌菌丝原生质消解、浓缩、断裂的物质；方敦煌等[17]研究表明，木霉菌能够寄生赤星病病菌孢子，抑制其萌发；杨合同等[18]发现，哈茨木霉(Trichodermaharzianum)LTR-2具有较高的酶活性和定殖能力，可用于植物病害的生物防治制剂的配制．

因此，为验证哈茨木霉菌LTR-2对烟草赤星病的田间防治效果，拟通过在有烟草赤星病病史的烟田开展小区药效比较试验，旨在为烟草赤星病的防控提供科学依据．

1 材料与方法

1.1 材料

供试品种为云烟87．供试药剂为2亿孢子/克哈茨木霉菌(LTR-2)可湿性粉剂(WP)(昆明农药有限公司)；化学对照药剂为40%菌核净可湿性粉剂(WP)(浙江省斯佩斯植保有限公司)；生物对照药剂为10%多抗霉素可湿性粉剂(WP)(昆明百事德生物化学科技有限公司)．

试验地块位于云南省昆明市嵩明县小街镇李官村(东经103.14°，北纬25.31°，海拔1 960 m)，该地块常年有赤星病发生，不进行施药防治的病叶率高达90%以上[6]．

试验烟苗于2020年2月23日采用漂浮育苗播种，2020年5月2日采用膜下小苗移栽．

1.2 方法

1.2.1 试验设计

试验设4个处理，包括哈茨木霉菌处理(A)、化学对照药剂处理(CK1)、生物对照药剂处理(CK2)和清水对照(CK0)．小区面积为50 m2，四周保护行面积50 m2，各小区采用随机区组设计，重复4次．其他栽培措施按照当地烤烟生产管理规范进行．

1.2.2 施药方法

各药剂均施用3次，第1次于现蕾期施用，第2次于中心花开放期施用，第3次于打顶后10 d施用，各药剂施用量见表1．施药时按小区用药量将药剂稀释成4 L，对烟株全株所有叶片均进行喷施．

表1 各处理药剂施用量

1.2.3 调查项目

每次施药后观察各药剂处理是否出现药害，分别调查各小区赤星病发病率、病情指数，并记录烤烟采烤后的烟叶产量、等级和价格．

1.2.4 药害调查方法

分别于施药后第1，3，5 d观察各药剂处理是否出现药害．采取各药剂处理与清水对照相比来评价药害程度，并将药害程度分为5级[19-20]：1)无药害；2)轻度药害；3)明显药害；4)高度药害；5)重度药害．

1.2.5 赤星病调查及鉴别方法

分别于第2、第3次用药前和第3次用药后第10 d及第20 d，采用5点取样法调查每个小区赤星病发病率和病情指数，每点固定调查3株，记录总叶数及各级病叶数．赤星病病株分级按照《烟草病虫害分级及调查方法》(GB/T 23222—2008)进行．

烟草赤星病鉴别方法参照商胜华等[19]和李淑君[20]的方法进行．

1.2.6 相对防效计算

病情指数用公式(1)计算，施药前有病情指数基数的防治效果用公式(2)计算，无病情指数基数的则用公式(3)计算．用 Duncan新复极差法进行统计检验．

病情指数 =[∑(各级病株数×相对级数值)/调查总株数×9] ×100,

(1)

相对防效= [1-(CK0×PT1)/(CK1×PT0)]×100%，

(2)

式中：CK0和CK1分别为对照区药前、药后病情指数；PT0和PT1分别为药剂处理区药前、药后病情指数．

相对防效=[(对照区病情指数-处理区病情指数)/对照区病情指数]×100%．

(3)

2 结果分析

2.1 药害观察结果

试验过程中各小区均未发现药害，说明各药剂对烟草生长发育安全．

2.2 各处理赤星病病情比较

从表2可以看出，各处理现蕾期均未发现赤星病病叶，中心花开放期开始零星出现赤星病病叶，各处理的赤星病病情指数均随时间推移而增长，打顶30 d后，各处理赤星病病情指数从低到高依次为：40%菌核净WP(3.81)<2亿孢子/克哈茨木霉菌WP(4.58)<10%多抗霉素WP(4.63)<清水对照(9.85)．

表2 各处理赤星病病情指数

2.3 各处理对赤星病的相对防效

由表3可知，各处理中心花开放期、打顶后10，20，30 d，CK1处理对赤星病的相对防效与其他2个处理之间差异有统计学意义，各处理的相对防效均随着时间的推移下降．打顶后30 d的调查结果显示，40%菌核净WP、2亿孢子/克哈茨木霉菌WP和10%多抗霉素WP对赤星病的相对防效分别为61.32%、53.50%和52.99%．40%菌核净WP对赤星病的相对防效极显著高于2亿孢子/克哈茨木霉菌WP和10%多抗霉素WP，而后两个生物药剂对赤星病的相对防效差异无统计学意义．

表3 各处理对赤星病的相对防效 %

2.4 各处理烟叶主要经济性状比较

各处理烟叶的主要经济性状见表4．3个药剂处理除烟叶产量外，均价、产值、中上等烟比例均极显著高于清水对照，且3个药剂处理烟叶的产量、均价、产值、中上等烟比例差异无统计学意义．3个药剂处理烟叶的产量从高到低的顺序为：10%多抗霉素WP>40%菌核净WP>2亿孢子/克哈茨木霉菌WP；3个药剂处理烟叶的均价、产值和中上等烟比例从高到低的顺序均为：40%菌核净WP>2亿孢子/克哈茨木霉菌WP>10%多抗霉素WP．

表4 各处理烟叶主要经济性状比较

3 结论与讨论

两个生物药剂在中心花开放期、打顶后10，20，30 d对烟草赤星病的相对防效均极显著低于化学对照药剂40%菌核净WP，2亿孢子/克哈茨木霉菌WP对烟草赤星病的相对防效与10%多抗霉素WP差异无统计学意义，说明2亿孢子/克哈茨木霉菌WP对烟草赤星病的防治效果与10%多抗霉素WP相当，是一种较为理想的烟草赤星病生物防治药剂．

3个药剂处理烟叶产量、均价、产值、中上等烟比例差异均无统计学意义，且这3个药剂处理的均价、产值、中上等烟比例均极显著高于清水对照，说明2亿孢子/克哈茨木霉菌WP与化学对照药剂40%菌核净WP和生物对照药剂10%多抗霉素WP具有同等的保障烟叶产量，以及提高中上等烟比例、均价和产值的作用．

综上所述，2亿孢子/克哈茨木霉菌WP对烟草赤星病的防效与生物对照药剂10%多抗霉素WP相当，其保障烟叶产量，以及提高中上等烟比例、均价和产值的作用与化学对照药剂40%菌核净WP和生物对照药剂10%多抗霉素WP相当．由此可知，2亿孢子/克哈茨木霉菌WP是一种较为理想的烟草赤星病生物防治药剂．