韩宇博，田苗，刘紫君，娄宏君，王瑞楠，张丹丹，郭东浩，刘莉*

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040)

胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)是指机体对胰岛素调节作用/葡萄糖利用敏感度反应下降，代偿性增加胰岛素分泌水平，以保持内环境及血糖稳态[1-2]。中医药在改善IR从而防治代谢性疾病及糖尿病方面具有鲜明特点，笔者前期研究[3-6]发现：黄连温胆汤可降低饮食诱导代谢综合征大鼠血压、血糖、体质量、血脂水平，降低炎性细胞因子及脂联素水平，可上调胰岛素受体底物、葡萄糖转运体等基因的mRNA和蛋白表达，改善IR。基于体外细胞培养体系研究黄连温胆汤含药血清的作用机制具有重要意义。体外研究中，如何制定含药血清与细胞培养体系的比例，能够产生最佳干预效果，是亟须解决的问题。因此本研究探讨黄连温胆汤含药血清干预IR-3T3-L1细胞的最佳浓度与时间，为后续进一步的机制研究提供确切的实验依据。

1 材料

1.1 实验细胞株及动物

3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞购买于中国科学院细胞库。30只SPF级雄性SD大鼠购自黑龙江中医药大学实验动物中心，体质量(200±20)g，动物许可证号：SCXK(黑)2 015 006。饲养环境温度22～24 ℃，相对湿度40%～50%；饲养密度为5只/笼，自由饮食水，隔日更换垫料，适应性饲养1周后用于实验研究，研究过程符合动物伦理学要求。

1.2 实验药品

黄连温胆汤：黄连10 g，清半夏10 g，竹茹15 g，枳实10 g，陈皮15 g，茯苓10 g，生姜5 g，炙甘草10 g，所有饮片购自黑龙江中医药大学附属第一医院草药局，经黑龙江中医药大学药学院生药学教研室鉴定，符合2015版《中华人民共和国药典》一部要求。……