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反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用

2021-07-26王素华王忠才黄凌哲莫虹斐吴绍强吕继洲赵治国帅江冰

畜牧兽医学报 2021年7期
关键词:检测方法

王素华,王忠才,黄凌哲,莫虹斐,吴绍强,吕继洲,赵治国,帅江冰

(1.温州海关综合技术服务中心,温州 325027;2.杭州海关技术中心,杭州 310012; 3.中国检验检疫科学研究院动物检疫所,北京 100029;4.呼和浩特海关技术中心,呼和浩特 010020)

反刍动物埃立克体(Ehrlichiaruminantium)是一类专性细胞内寄生的革兰阴性细菌[1]。由反刍动物埃立克体引起的疾病统称心水病,是一种人畜共患的自然疫源性疾病[2],这种疾病几乎分布在撒哈拉沙漠以南非洲的所有地区和加勒比海的一些岛屿上,并传播至其他国家,其传播者主要是钝眼蜱属的希伯来钝眼蜱和美洲钝眼蜱[3-5]。该病是牛、绵羊、山羊及其他反刍动物最重要的传染病之一,临床症状包括发热、食欲不振、呼吸困难和猝死,死亡率高达80%[2,6-7]。心水病的流行与传播媒介蜱的消长和活动规律相一致,具有明显的地方性和季节性[1-7]。心水病不仅威胁农牧业健康发展和食品安全,对流行国家造成了巨大的经济损失,而且被认为是一种潜在的新出现的人畜共患病[8-9]。

早期诊断可以有效控制反刍动物心水病。心水病传统的诊断方法是基于临床症状的血液涂片镜检和血清学检测,这些检测方法耗时较长,难以适应快速诊断和控制疫情的需要,也不适合蜱样本内的Ehrlichiaruminantium检测[10]。随着分子检测技术的快速发展,常规PCR、套式PCR、LAMP和荧光定量PCR等检测技术已应用于反刍动物血液和蜱体内Ehrlichiaruminantium的检测[11-13]。这些检测方法各有优缺点,常规PCR方法特异性和敏感性较低,扩增时容易产生假阳性;……

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