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牛星状病毒、牛病毒性腹泻病毒1型、牛冠状病毒和牛轮状病毒四重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

2021-07-26刘梦瑶王展慧吴文学

畜牧兽医学报 2021年7期
关键词:检测方法

刘梦瑶,王展慧,吴 浩,谷 月,吴文学

(中国农业大学动物医学院,北京 100193)

犊牛腹泻是世界范围内引起犊牛疾病最重要的因素[1]。引起犊牛腹泻的病毒主要有牛星状病毒(bovine astroviruses,BAstV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCV)和牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)等。这四种病毒在国内均有流行。据调查在发生腹泻的犊牛粪便中BAstV阳性率为5.2%~9.9%[2-4]。对于BVDV,虽然在犊牛耳缘组织和血液中病毒阳性率较低,但血液抗体阳性率较高,达15.94%~91.10%,且主要为BVDV-1型[5-7]。BCV在具腹泻症状犊牛粪便样本中的抗原阳性率为0.0%~26.4%[2,4,8-10]。BRV在中国具腹泻症状犊牛粪便样本中的抗原阳性率为9.20%~73.83%[2,4,9-12]。

星形病毒是鸟类和哺乳动物腹泻疾病的致病因素[13],Mitchell等[14]发现从腹泻前1~8 d开始至腹泻停止后的1~20 d能检测到星状病毒排毒。BAstV感染1~4月龄犊牛将导致排大量水样棕褐色至黄色的粪便和黏液等症状的严重的急性肠道疾病,多数症状在发病后5~7 d消失,少数则会演变为慢性病,导致明显的发育延迟和少毛症[15]。BVDV非细胞病变型和细胞病变型感染犊牛后均会导致一些温和的急性呼吸道疾病和腹泻的症状:感染后3~5 d开始出现精神沉郁,拒食,体温高达41.9 ℃,从鼻腔和眼睛排出浆液性分泌液,短期血便,白细胞减少症(可低至2 700 个·mm-3),并且呼吸器官及肠道有肉眼可见的变化。这些感染的动物大多在感染后12~15 d后恢复,并且90%的病例在感染25 d后形成体液免疫[16]。非细胞病变型BVDV急性感染妊娠25~90 d的母牛,通过抑制干扰素tau刺激的子宫内膜Ⅰ型干扰素刺激基因的产生等原因使病毒逃避子宫内膜中的宿主检测,穿过胎盘进入免疫系统未发育完全的胎儿建立持续感染,持续感染的牛终身排毒[17-20]。……

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