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谷氨酸棒杆菌GPAT 功能基因鉴定与分析

2021-07-26刘翠翠李友元王永红

关键词:油脂

刘翠翠, 李友元, 王永红

(华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237)

生物柴油是由动植物油脂、微生物油脂及一些垃圾油脂等可再生物质通过酯交换过程得到的一种环境友好型燃料[1-2]。微生物油脂具有生产周期短、可连续生产、可规模化利用自然界的丰富资源等特点,脂肪酸组成也易通过基因工程手段进行改造,因而微生物油脂成为第三代生物柴油重要的原料来源[3]。本实验室前期利用食品级安全菌株谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)通过理性的基因改造手段获得了产油菌株CT14,显示了谷氨酸棒杆菌作为微生物油脂生产菌的潜力,有必要进一步研究其作为产油微生物的宿主菌对微生物油脂的合成与调控机制[4]。

甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)催化3-磷酸甘油和脂肪酰基辅酶A 生成溶血磷脂酸(LPA),是甘油三酯和甘油磷脂合成的第一步反应且可能为限速步骤[5],在油脂的合成过程中起重要作用[6]。研究表明,在集胞藻PCC6803 中,GPAT 的编码基因被验证是该菌油脂合成的重要基因[7]。Paya 等[8]在酵母中过表达向日葵gpat9(Hagpat9)基因,使酵母三酰基甘油(TAG)总量增加,并且脂肪酸组分也发生了改变。然而,KEGG 数据库显示,在谷氨酸棒杆菌的基因组中没有明确标注的GPAT 的功能基因。Holder 等[9]通过比较谷氨酸棒杆菌与其他产油微生物的功能基因组后也指出谷氨酸棒杆菌缺少GPAT 的功能基因(EC 2.3.1.15)。但正如文献[4]中所指出的GPAT 是微生物细胞膜脂质合成途径中的重要酶,谷氨酸棒杆菌能正常生长,说明谷氨酸棒杆菌肯定存在类似GPAT功能的蛋白。……

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