快速鉴定草莓枯萎病的LAMP检测技术
2021-07-24韩富庆史芳芳
生物灾害科学 2021年2期
关键词:检测
韩富庆,史芳芳
快速鉴定草莓枯萎病的LAMP检测技术
韩富庆,史芳芳*
(新疆生产建设兵团第十二师农业科学研究所,新疆 乌鲁木齐 830063)
【目的】建立草莓枯萎病的镰刀菌快速检测方法。【方法】利用环介导等温扩增技术(LAMP)针对镰刀菌保守区域ITS设计一套LAMP扩增引物,利用Bst DNA聚合酶完成LAMP扩增反应,对7种常见病原菌进行检测,分析LAMP引物的特异性;比较LAMP与传统PCR方法的敏感性。【结果】建立的LAMP法能够特异性的检测尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌,并且检测灵敏度为1.0×10-4ng/μL,是普通PCR检测灵敏度的1 000倍。【意义】试验所建立的草莓枯萎病快速LAMP检测方法,具有灵敏度高、快速及简便的优点,可以向基层单位推广使用。
环介导等温扩增;镰刀菌;炭疽菌
【研究意义】草莓(Duch.)属蔷薇科草莓属多年生草本植物,果肉鲜美多汁,堪称“水果皇后”。近年来,草莓种植面积逐年增大,品种不断更新,频繁地调种、引种以及连作,导致草莓病害发生较为普遍。目前,影响草莓生产的主要病害是草莓枯萎病[1-2],鉴定和检测草莓病害的主要方法是形态学观察和分子生物学PCR扩增法,这两种方法中,形态学鉴定方法耗时长,需要具备专业知识,且有时对于不常见病原菌会判定不准确,而分子生物学检测方法需要昂贵的仪器设备,且对检测产物需要测序才能判定为是何种病原菌感染[3],因此,亟需一种能够在发病初期或者土壤中进行早期快速检测的技术,以便及时采用有针对性的有效防治措施来控制病害的发生和传播。……
登录APP查看全文
