陈林津，李 岩，肖韩艳

(牡丹江医学院，黑龙江 牡丹江 157011)

动脉粥样硬化(AS)是心脑血管疾病的最常见病因，是临床研究重点。AS是一个复杂的过程，涉及多种细胞和分子。巨噬细胞极化是动脉粥样硬化的重要病理生理环节。巨噬细胞极化是近年来动脉粥样硬化治疗研究的热点，巨噬细胞通过细胞内外受体感受微环境中不同的极化信号，通过不同的信号转导途径调控基因表达，成为具有不同表型和功能的M1型和M2型巨噬细胞[1]。本研究从调节巨噬细胞极化方面探讨姜黄素对AS的调控作用。

1 材料和方法

1.1 实验动物和分组4周龄SPF级雄性ApoE-/-小鼠12只(购于维通利华公司)。随机分3组，每组4只。空白组：给予高脂饮食+等量1 %羧甲基纤维素钠灌胃；高浓度姜黄素组：给予高脂饮食+姜黄素200 mg/(kg·d)灌胃；低浓度姜黄素组：给予高脂饮食+姜黄素30 mg/(kg·d)灌胃，1次/d，连续8周。

1.2 实验材料和器材姜黄素(美国Sigama公司)；羧甲基纤维素钠(湖南汇虹试剂有限公司)；高脂饲料(派克生物公司，由Reasearch Diet生产)；iNOS、Arg-1、NF-κB、IL-10、β-actin抗体(Sangon公司)；低温离心机(Eppendorf公司5804R)；-80 ℃冰箱(Thermal公司)；PCR自动系列化分析仪(Bio-rad公司Thermal Cycler S1000)；Ttotal RNA Kit(Omega公司R6834-02)；Transcriotor first strand cDNA synthesis Kit(Roche公司04897030001)；实时荧光定量PCR仪(Applied Biosystems公司)；FastStart universal SYBR Green Master(Roche公司RC-4913914001)。

1.3 血脂检测ApoE-/-小鼠灌胃8周，禁止饮食不禁水12 h后，腹腔注射7%水合氯醛麻醉，剪去腹部毛发，开腹从腹主动脉中取血，样本室温静置1.5 h，4 ℃、4000 rpm/min离心10 min，吸取上层血清进行血脂检测。

1.4 HE染色取小鼠主动脉，生理盐水冲洗三遍，10 %甲醛溶液固定12 h，石蜡包埋，切片为5 μm厚度，进行HE染色，利用光学显微镜进行观察并拍照记录，进行图片数据分析，计算校正斑块面积(斑块面积/血管横截面积)%。……