周 倩，郭宝娟，王 慧，梁 军，白雨鑫，杨晓帆，陈 培

(牡丹江医学院1.基础医学院病理学与病理生理学教研室；2.基础医学院组织与胚胎学教研室；3.第一临床医学院病理学教研室；4.附属红旗医院康复科，黑龙江 牡丹江 157011)

帕金森病(Parkinson disease,PD)是临床上最常见的神经变性疾病之一，病理特征表现为中脑黑质多巴胺能神经元的缺失和α-突触核蛋白的聚集[1]。目前临床上常规使用的多巴胺替代疗法只能缓解部分临床症状，无法减缓多巴胺能神经退行性变的进展。抗氧化治疗在一定程度上为帕金森的治疗开辟了新的方向。丁苯酞由中国医学科学院自主研制从芹属种子中提取分离出来的化合物，目前用于缺血性脑卒中的治疗。许多新的研究成果发现丁苯酞帕金森病也发挥了重要的保护作用[2]，同时临床研究也发现了丁苯酞在帕金森病患者中也有一定的疗效，但药理作用涉及许多复杂的分子机制，有待进一步研究。

1 材料与方法

1.1 细胞与试剂人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞(购自于上海酶研生物有限公司)、丁苯酞(购自中国食品药品检定研究所，药物纯度>99.98%)、MPP+(购自美国Sigma公司)、NO试剂盒(购自上海碧云天公司)、α-突触核蛋白及β-actin一抗(购自affinity生物公司)。

1.2 主要仪器CO2恒温培养箱、-80 ℃冰箱、4 ℃低温离心机、低温高速离心机、酶标仪、100～1000 μL微量移液器、分析天平、电子显微镜(日本OLYMPUS-IX71)、蛋白电泳和转膜设备、凝胶成像系统。

1.3 实验方法

1.3.1 细胞培养 将SH-SY5Y细胞株置于DMEM/F12=1∶1(含10 %的胎牛血清)的培养基，37 ℃，5% CO2孵育箱中培养，每2～3 d细胞换液1次，镜下观察细胞密度达到70%～80%时可以进行传代及相关实验。