木尼拉·马哈德 哈斯也提·艾力 帕丽达·帕拉哈提

结直肠癌是一种发病率和病死率均较高的恶性肿瘤。近年来随着生物学技术的进步，结直肠癌患者的预后生存率得到一定的提高，但仍是导致人类死亡率的主要原因之一[1]。临床上大部分患者确诊时，已错过最佳治疗时间，导致预后较差[2]。分子靶向治疗具有较强的特异性以及较小的不良反应，因此成为提高结直肠癌患者预后的研究重点。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类含18～25个核苷酸的非编码RNA，可通过结合于特定基因3，端非翻译区(Untranslated region，3，UTR)，调节其转录或翻译过程，影响细胞的增殖、迁移和侵袭等生命过程，在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。miR-3182是近年来新发现的一种 miRNA，其在结直肠癌组织中异常表达，但其对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响还未知[3,4]。为探究miR-3182在结直肠癌的发生、发展过程中的作用以及分子机制，本实验从细胞水平进行研究，探讨miR-3182对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及调控机制，以期为结直肠癌病理演进分子机制的进一步阐释提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验主要材料 结直肠癌细胞系(HCT116、SW480、SW620)购自北纳生物有限公司，DMEM培养基、胎牛血清、Trizol试剂购自美国Thermo公司，Lipofectamine 2000购自美国Life Technologies公司，反转录试剂盒、荧光定量PCR(Quantitative polymerase chain reaction,qPCR)购自南京凯基生物有限公司，噻唑蓝(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)购自美国Bio Basic Inc公司；Transwell小室购自美国Corning公司，miR-3182 模拟物以及对照质粒购自上海吉凯生物有限公司。酶标仪购自美国Bio-BRAD公司，7500荧光定量PCR仪购自美国ABI公司。

1.2 细胞的培养 结直肠癌多种细胞系(HCT116、SW480、SW620)采用含10%胎牛血清DMEM培养基进行培养，置于5%CO2、37℃培养箱孵育，倒置显微镜观察结直肠癌细胞系生长状态，每2～3天加入胰酶消化、传代。……