田姗 江海 刘慧 曹霞 张丹 牟尚东 李曾

宫颈癌是一种恶性肿瘤，其发病率和病死率呈升高趋势，已成为继乳腺癌之后威胁女性生命健康的第二大恶性癌症[1,2]。手术、化疗、放疗是宫颈癌的常用治疗方法，但其对机体伤害较大，且肿瘤易复发、患者不良反应较重[3]，因此寻找治疗宫颈癌的有效手段、提高患者生活质量已成临床研究的热点。有研究发现，miRNA参与多种肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移等生理过程，并影响肿瘤发生发展[4]。miR-375是一种肿瘤抑制因子，可参与宫颈癌等多种肿瘤的生物学过程[5]。人同源盒基因1(human homeobox gene 1，OTX1)也参与多种肿瘤的增殖、迁移等恶性生物学过程[6]，但miR-375靶向调控OTX1表达参与宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移过程，笔者还未见报导。本研究探讨miR-375靶向调控OTX1表达参与宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移过程，以期为临床宫颈癌治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 细胞 宫颈癌HeLa细胞株(厂家：北京索莱宝科技有限公司，货号：SCC-112011-1)。

1.2 主要试剂与仪器 实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR，qRT-PCR)试剂盒(货号14966005)均购自于美国ThermoFisher公司；反转录试剂盒(货号K1622)购自于美国Fermentas公司；Trizol轴提取试剂盒(货号46301)购自于美国Sigma公司；荧光素酶活性试剂盒(货号E2920)购自于美国promega公司；荧光素酶报告载体由上汉恒生物公司提供；miR-375激动剂(miR-375 mimic)由英国Cohesion Biosciences公司提供(货号：CMH0171)；miR-375抑制剂(miR-375 inhibitor)由江苏百奥迈科生物技术有限公司提供(货号：hsa-miR-375)；LipoGene 2000 Star Transfection Reagent转染试剂盒(货号： L7002)由苏州宇恒生物科技有限公司提供；鼠抗人单克隆细胞增殖核抗原(nuclcar-associated antigen，Ki-67)抗体(货号sc-23900)、鼠抗人单克隆金属蛋白酶组织抑制物-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2)抗体(货号sc-21735)均购于美国Santa Cruz公司；……