林 娟，晋 龙，吴晶晶，郭国栋

恶性黑色素瘤的诊断依赖于HE及免疫组化染色结果。大部分黑色素瘤含有黑色素细胞，这影响了HE组织细胞形态观察，且免疫组化中DAB染色呈棕黄色或棕褐色，易被黑色素颗粒物掩盖，影响判读。孙丽君和黄斌[1]提出的双重氧化脱黑色素颗粒方法能较好的脱去黑色素颗粒；传统的高锰酸钾或过氧化氢也能够脱去黑色素颗粒，有研究证实37 ℃温箱加热高锰酸钾及65 ℃水浴加热过氧化氢可加快祛掉黑色素[2-3]；微波加热法也能加快脱去黑色素颗粒[4-5]。上述方法均能达到脱色素的效果，但未见文献对脱黑色素后HE及免疫组化染色结果进行系统的比较。本实验比较5种脱色素方法对HE及免疫组化染色结果的影响，用于辅助恶性黑色素瘤的鉴别诊断。

1 材料与方法

1.1 一般资料收集福建省立医院病理科2015～2019年诊断的20例恶性黑色素瘤。其中男性11例，女性9例，患者年龄42～87岁，平均65.9岁。主要发病部位眼球5例、鼻腔8例、四肢7例。

1.2 主要试剂和仪器高锰酸钾、草酸、30%过氧化氢购自同春药业；Ki-67、Melan-A、HMB45、p130Cas单克隆抗体购自福州迈新公司。Leica RM2245切片机，美的M1-211A微波炉。

1.3 试剂配制0.5%高锰酸钾：0.5 g高锰酸钾+100 mL蒸馏水；5%草酸：5 g草酸+100 mL蒸馏水；15%、10%、7.5%、5%过氧化氢：30%过氧化氢100 mL、50 mL、25 mL、15 mL+100 mL蒸馏水。

1.4 方法

1.4.1组织切片制备 20例石蜡组织标本3 μm厚连续切取切片46张。每组病例6张用于HE脱色前后对比染色，24张用于免疫组化(4种抗体)，16张用于4种浓度过氧化氢脱色素后免疫组化染色。

1.4.2脱色素方法 (1)高锰酸钾脱色素法：0.5%高锰酸钾10～20 min，2.5%草酸漂泊1～2 min。(2)高锰酸钾(微波加热)脱色素法：将切片放入盛有50 mL 0.5%高锰酸钾的立式染缸，置微波炉中并调至最低档辐射1 min，待冷却2.5%草酸漂泊1～2 min。……