尤炫合，吴迪伟，罗 明，周欣然，黄石书

青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis, AIS)是最常见的一类三维脊柱畸形，椎旁肌病理性改变继发的两侧椎旁肌失平衡是AIS发生、进展的重要原因[1-2]。临床肌肉标本对于此类疾病的诊断和研究具有重要价值，但对于处理不当或长期冷冻保存的肌肉标本，由于冰晶的挤压，肌纤维结构遭到破坏。为解决上述问题，本科室尝试一种针对冷冻肌肉组织修复的方法，主要通过增加组织切片修复环节，使组织病理形态更加接近于组织原本的形态学结构，有利于肌肉病理的诊断和研究，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料随机选取20例保存于四川大学华西医院生物样本库中的AIS凸侧肌肉标本。纳入标准：(1)患者均签署四川大学华西医院伦理委员会知情同意书；(2)确诊为AIS，并留有手术后切除凹凸两侧椎旁肌冻存样本；(3)肌肉样本保存较好。所有肌肉标本取自手术中椎旁肌，离体后置于1.8 mL冻存管，并直接冻存于液氮罐，后转移至-80 ℃冰箱长期保存。肌肉标本取出时呈柱状，经解冻、固定液处理后，样本较散乱，形状不规则，可分辨出肌肉纹理走向。

1.2 方法标本均经10%中性福尔马林(成都金山化学试剂公司)固定48 h，脱水、透明后，选取横切面进行石蜡包埋。采用石蜡组织切片机(LEICA RM2245)4 μm厚切片，每块组织连续切片6张，65 ℃烤片45 min后脱蜡复水。分成传统组和改良组，每组3张切片。改良组HE染色前，对切片进行微波修复，配置1×柠檬酸钠抗原修复液(索莱宝C1032)250 mL，将切片浸入修复液后，放入微波炉中高火8 min修复2次，待柠檬酸钠抗原修复液自然冷却至室温后，取出切片。……