免疫组化烘蜡条件的探讨
2021-07-21沈洪武沈静华
沈洪武,沈静华
免疫组化切片的烘蜡条件目前尚无统一的标准。梁英杰主编的《临床病理学技术》提供的烘蜡条件是62~65 ℃ 60~120 min[1]。北京中杉金桥公司《产品目录》提供的烘蜡条件是70 ℃ 60 min。来茂德主编的《病理学高级教程》提供的烘蜡条件是60 ℃ 60 min[2]。罗氏诊断产品(上海)公司的清洗液说明书提供的烘蜡条件是65~75 ℃ 2~24 h。Dako公司IHC Microscope Slides说明书提供的烘蜡条件是切片在室温下完全干燥后,56~60 ℃ 20~60 min。在实际工作中,烘蜡条件为60~70 ℃ 60 min,部分组织易脱片(例如子宫颈锥切组织和乳腺组织);烘蜡条件为65~75 ℃ 120 min,组织不会脱片,但是太耗时,影响病理诊断时效(DAKO公司的烘蜡总时长也会超过120 min)。本科室对不同的烘蜡条件进行试验,并通过130种抗体,历经8个月完成56 000张切片的实用测试,发现65 ℃ 120 min、75 ℃ 60 min、85 ℃ 30 min均是可行的免疫组化烘蜡条件,综合考虑烘蜡时间,认为85 ℃ 30 min对免疫组化结果影响较小、效果佳,值得临床推广应用,现介绍如下。
1 材料与方法
1.1 材料收集福建医科大学附属漳州市医院病理科存档的乳腺组织蜡块(HER-2 3+)和子宫颈锥切组织蜡块各30例。正电荷亲水型防脱载玻片1号(漳州武德生物公司,U-004),正电荷亲水型防脱载玻片2号(日本松浪公司,PRO-04),正电荷亲水型防脱载玻片3号(Dako公司,K8020)。电热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械公司,GZX-GF-MBS-2)。罗氏全自动免疫组化染色仪(BenchMark ULTRA IHC/ISH Staining Module)。PR(罗氏公司,790-4296 E22157),HER-2(罗氏公司,790-4493 E16719),Ki-67(罗氏公司,790-4286 E30677),EMA(福州迈新公司,Kit-001119040205 816),EDTA抗原修复液(福州迈新公司,MVS-0098190314 4251),苏木精(福州迈新公司,CTS-1090 1903190459),UltraView Universal DAB(罗氏公司,790-500 E18998)。
1.2 方法上述组织蜡块4 μm厚切片,分别裱贴于上述防脱载玻片,分组烘片(表1)。

表1 组织切片分组和组……
