自加吉，李 彬，杨 娜，普元倩，李素芬，王唯斯，张 态，熊 伟

恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma, MPM)具有高度侵袭性，其发病率和病死率在全球范围内仍呈上升趋势。MPM的发病主要与石棉暴露有关，且患者预后较差，5年生存率仅为5%[1-2]。不同国家MPM的发病率差异较大，国外以澳大利亚最高，发病率约为3.54/10万，国内每年发病率为0.3～0.5/10万，以云南省最高(8.5～17.75/10万)[3-4]。目前，MPM的诊断标准主要为胸腔镜活检，缺乏准确的早期诊断标志物[5]。因此，发掘新的肿瘤标志物能有效提高早期MPM的检出率，从而为患者提供及时的治疗。

赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase, LOX)是一类铜依赖性胺氧化酶，其活性在胶原蛋白和弹性蛋白交联中发挥作用[6]。LOX蛋白家族共有5个成员，分别为LOX、赖氨酰氧化酶样蛋白1～4(lysyl oxidase like 1-4, LOXL1-4)[7]。LOX蛋白具有催化细胞外基质(extracellular matrix, ECM)交联的作用，维持ECM的结构和功能[7]。近年研究表明，LOX基因异常表达与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关，尤其是在促进肿瘤转移的过程中发挥重要作用[8]。然而，LOX基因在MPM中的表达及其发生、发展中的作用机制尚不明确。本实验旨在阐明LOX基因在MPM中的表达情况，分析其对患者预后的影响，探索其临床价值。

1 材料与方法

1.1 细胞培养人胸膜间皮细胞系MeT-5A和3种人MPM细胞系NCI-H28(上皮样型)、NCI-H2052(肉瘤样型)和NCI-H2452(双相混合型)均购自美国典型菌种保藏中心(American Type Culture Collection, ATCC)。将3种MPM细胞系用含10%(v/v)胎牛血清(FBS)和1%(v/v)抗生素(100 U/mL青霉素，100 mg/L链霉素)的RPMI-1640培养基(Gibco, Thermo Scientific公司, USA)进行体外培养。将MeT-5A在含有厄尔平衡盐溶液(BSS)，0.75 mmol/L的L-谷氨酰胺和1.25 g/L的碳酸氢钠的培养基199(Nissui公司，Janpan)中培养，并补充3.3 nmol/L的表皮生长因子，400 nmol/L氢化可的松，870 nmol/L胰岛素，20 mmol/L的4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液(HEPES)和10%(v/v)FBS。……