赵杰炳 田浩 尚付生 冯建军

骨肉瘤是常见的原发性骨恶性肿瘤，肺和骨是最常见的转移部位［1⁃2］。手术和辅助化疗能延长骨肉瘤患者的生存期，但复发、转移或不能手术切除患者的预后仍不理想［3⁃6］。因此，寻找治疗骨肉瘤的新方法对提高患者生存期具有重要的临床意义。近年来，研究者们探索了晚期肉瘤多种细胞免疫治疗方案［7］。树突状细胞（dendritic cells，DC）作为体内启动细胞免疫反应的主要抗原呈递细胞，可用于增强肿瘤特异性免疫反应［8］。而细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine⁃induced killer cells，CIK）是体内重要的免疫活性细胞，增殖能力和细胞毒作用强，也能特异性识别肿瘤细胞，已成为肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案［9］。DC⁃CIK治疗是指将上述两种细胞进行共培养，从而发挥更强的肿瘤杀伤作用，目前在包括骨肉瘤在内的多种恶性肿瘤中得到了初步验证［10］，但DC⁃CIK治疗骨肉瘤确切的作用尚未明确。研究发现，抑制程序性细胞死亡蛋白⁃1（programmed death receptor⁃1，PD⁃1）及其配体（programmed death receptor ligand⁃1，PD⁃L1）能显著增强DC⁃CIK对肝癌细胞的杀伤作用，诱导更有效的免疫细胞浸润，说明PD⁃1/PD⁃L1信号通路可能是DC⁃CIK疗法的重要机制［11］。PD⁃1/PD⁃L1通路是否在DC⁃CIK治疗骨肉瘤中发挥同样作用尚未见报道。本研究通过共培养DC和CIK，探讨其对人骨肉瘤细胞的杀伤作用及其初步的作用机制。

1 材料和方法

1.1 主要材料和试剂

人骨肉瘤细胞HOS细胞株购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心；6只BALC/c雌性裸鼠购自中国科学院上海实验动物中心，许可证号为SCXK（沪）2016⁃2017，鼠龄8～10周，体重25～30 g，饲养于SPF级动物实验室中，自由饮水饮食，动物实验的操作经本院动物实验伦理委员会审核批准。……