卞伟钢 陈平 周小宁 陈海婷 宋曙

胃癌是常见的消化系统恶性肿瘤，化疗是晚期胃癌患者的主要治疗方式，但有效率仅为40%，其中化疗药物耐药是影响疗效的主要原因之一［1⁃2］。因此，深入研究胃癌的耐药机制，有助于提高癌细胞对药物的敏感性，从而提高疗效。长链非编码RNA（lncRNA）是长度超过200 nt的非编码核苷酸片段。既往研究显示lncRNA异常表达与肿瘤发生及耐药性有关［3］。其中有研究报道长链非编码（lncRNA）核仁小RNA宿主基因 l（small nucleolar RNA host gene l，SNHGl）通过调控DNA甲基转移酶1（DNMT1）促进胃癌细胞增殖［4］。也有研究发现 miR⁃101⁃3p 在调控肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移和分化中发挥重要作用，其异常表达与肿瘤耐药性有关［5］。FAN等［6］在胰管腺癌中过表达miR⁃101⁃3p发现能抑制核糖核酸还原酶M1（RRM1）表达，提高细胞对吉西他滨的敏感性。在非小细胞肺癌中上调lncRNA SNHG1表达可抑制miR⁃101⁃3p表达，激活Wnt/β⁃catenin信号通路从而参与非小细胞肺癌进展［7⁃8］。奥沙利铂（OXA）是胃癌化疗的主要组成药物之一，但目前胃癌奥沙利铂耐药的机制尚未清楚。本研究探讨lncRNA SNHG1对人胃癌细胞BGC⁃823奥沙利铂耐药性的影响及其是否通过靶向调控miR⁃101⁃3p发挥作用，以期为胃癌奥沙利铂耐药性提供新的研究方向。

1 材料与方法

1.1 主要材料与试剂

人胃癌细胞BGC⁃823购于中国科学院细胞库；奥沙利铂购自江苏恒瑞制药有限公司；si⁃SNHG1和si⁃NC由Thermo公司设计并合成；Trizol试剂、LipofectamineTM2000、双荧光素酶检测试剂盒购自美国Invitrogen公司；SNHG1、miR⁃101⁃3p、人类多药耐药基因（multi⁃drug resistance gene 1，MDR1）、U6、β⁃actin引物序列由上海生工生物工程有限公司设计并合成；RIPA裂解液、BCA试剂盒、ECL试剂盒、HRP标记羊抗兔IgG抗体等均购自上海碧云天生物技术有限公司；……