刘新宇 罗涛 蒋志俊 刘昊天 黎乐群

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是全球范围内癌症相关死亡的主要原因之一，占全部原发性肝癌的80%～90%［1］。目前国际主流的治疗方式为肝切除、肝移植或经皮局部消融，并以经肝动脉化疗栓塞（TACE）、放疗、全身药物治疗等手段配合治疗，但术后1年内复发率仍接近40%，5年生存率仅为15%～40%［2］。探索肝癌发生发展的分子机制，寻找新的早期诊断标志物及预后预测的分子靶点对提高患者生存期具有重要意义。环状RNA是具有共价键闭环结构的特殊非编码 RNA［3⁃4］，在转录及转录后水平具有重要的基因表达调控作用［5］。研究表明，环状RNA在肿瘤发生发展中发挥着重要的调控作用，参与肿瘤发生、侵袭和迁移等恶性生物学行为［6⁃8］。本课题组前期根据HCC术后切除组织的高通量测序结果，筛选出一组包括57个差异表达的环状RNA与HCC患者不良预后显著相关，查阅文献尚未见hsa_circ_0000591在HCC中的报道。因此，本研究检测hsa_circ_0000591在HCC组织及肝癌细胞系中的表达，同时构建hsa_circ_0000591沉默的肝癌细胞模型，探讨其对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响，为阐明hsa_circ_0000591在肝癌中的作用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要材料及试剂

1.1.1 临床样本 收集2014—2018年于广西医科大学附属肿瘤医院接受肝癌切除术的84例HCC患者癌组织及其相应癌旁正常组织标本。纳入标准：经组织病理学检查诊断为HCC，术前未行放疗、化疗或靶向药物治疗等抗肿瘤治疗。本研究方案获广西医科大学附属肿瘤医院伦理委员会批准，患者或家属知情同意。通过门诊或电话随访，术后每3个月随访1次，随访内容包括肿瘤复发或死亡，随访时间截至2021年2月1日。……