葛程童, 褚文宁, 姚善泾, 林东强

新型人血白蛋白分离介质吸附性能及重组人血白蛋白分离

葛程童, 褚文宁, 姚善泾, 林东强

(浙江大学生物质化工教育部重点实验室, 浙江大学 化学工程与生物工程学院, 浙江 杭州 310027)

针对毕赤酵母发酵液中分离重组人血白蛋白(rHSA)，采用新型介质IAA-CYS，探讨HSA吸附性能，优化分离条件，实现rHSA高效分离。考察了不同pH和盐浓度下IAA-CYS介质对HSA的吸附，发现pH为4.5是最佳条件，HSA饱和吸附容量达到157.6 mg×mL-1，盐浓度影响较小。测定了不同NaCl浓度和线性流速下 IAA-CYS介质对HSA的动态载量，发现流速影响较大，合适流速为100 cm×h-1；盐浓度影响较小，无需对酵母发酵液进行稀释预处理，rHSA动态载量达48.3 mg×mL-1。进一步优化了发酵液中分离rHSA，上样pH为4.5，上样流速为100 cm×h-1，上样量为38.6 mg×mL-1，在pH为5.0和质量浓度为400 mg×mL-1的NaCl条件下淋洗，在pH为8.0和质量浓度为200 mg×mL-1的NaCl条件下洗脱，rHSA纯度为90.1%，收率为88.6%。结果表明，IAA-CYS介质分离rHSA条件温和，耐盐性好，料液无需稀释预处理，过程简便高效，具有良好的应用前景。

人血白蛋白；层析介质；吸附性能；蛋白分离

1 前 言

人血白蛋白(human serum albumin，HSA)是人血浆中含量最丰富的蛋白质，临床上HSA主要用于治疗因失血、创伤、烧伤、整形外科手术及脑损伤引起的低蛋白血症以及肝硬化、肾水肿等恶性病变，在癌症和艾滋病人放化疗的辅助治疗中也有较大需求[1]。目前治疗用HSA只能通过健康人血浆分离得到，由于血浆来源有限，HSA供给十分紧张，且存在血源性病原体的潜在风险，采用基因工程技术生产重组人血白蛋白(recombinant human serum albumin，rHSA)有助于解决相关问题。……