张媛媛，黄 为，刘 华，马小松，周全华△

(1.重庆市疾病预防控制中心，重庆 400042；2.重庆市预防医学会，重庆 400042)

获得性免疫缺陷综合征又称为艾滋病，是感染人类免疫缺陷病毒(HIV)而引发的获得性免疫系统缺陷疾病，此病毒进入人体后专性侵犯免疫系统中最重要的CD4+T淋巴细胞，破坏人体免疫系统，使人体失去抵抗力，易于感染各种病毒以致各种并发症，具有传播迅速、发病缓慢、病死率高等特点，至今尚无有效疫苗，是一种严重威胁人类健康和社会发展的重大传染病。对人感染HIV的诊断主要依赖于实验室检测，其中抗体检测常规筛查方法有快速检测、酶联免疫吸附试验及其他试验，包括化学发光或免疫荧光试验。HIV检测补充实验有抗体确证试验[WB(免疫印迹法)、重组免疫印迹法/线性免疫法(RIBA/LIA)]和核酸检测。早发现、早诊断、早治疗是防控艾滋病的关键。目前，重庆市对HIV检测的流程为各个筛查实验室对采集的血液样本进行初次筛查，若有反应则进行双孔/双份或2种试剂复检，复检有反应则送样到该辖区确证实验室进行确证试验，确证实验室收到样本后对其再次复核，若仍为有反应则进行确证试验。为避免给患者或疑似患者人群带来心理恐慌，重庆市HIV检测网络系统通过多年的建设及完善，对样本采集、信息填报、运输等各检测流程严格把控，以确保每份样本检测结果分析的准确性。为了解重庆市HIV感染状况和筛查与确认的符合情况，指导临床医师对患者感染状况进行预判，做好个人职业防护，本研究对2017-2019年重庆市属各医院、疾病预防控制(疾控)中心及性病门诊检测点送检的HIV抗体筛查有反应性血液样本进行了统计分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1样本来源 2020年6月收集重庆市艾滋病确证中心实验室辖区各筛查实验室2017-2019年送检的初筛有反应性样本，以及非政府组织和性病门诊检测点采集的样本9 010份，其中有反应性4 754份。

1.1.2试剂及仪器 筛查试剂为BIO-RAD HIV抗原抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)，每盒576人份，Alere DetermineTMHIV 1+2型抗体检测试剂盒(胶体硒法)，100个测试/包装袋。确证试剂为新加坡MP生物医学亚太私人有限公司生产的HIV BLOT2.2 HIV 1+2抗体测试试剂盒(免疫印迹法)，每盒36人份，Mikrogen GmbH德国麦克莱金公司生产的HIV 1+2抗体确证试剂盒(条带免疫法)，每盒20人份。本研究所使用试剂均经国家食品药品监督管理局注册批准，且均在有效期内使用。检测仪器为Autobio PHOMO酶标仪、Autobio IWO960洗板机、TECAN ProfiBlot48全自动蛋白印迹仪等，所有仪器均经检定校准合格。

1.2方法

1.2.1HIV检测 常用的HIV筛查试验有酶联免疫吸附试验、化学发光或免疫荧光试验、快速检测及其他试验[1]。对送检有反应性的样本采用法国伯乐4代HIV抗原抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)和美国雅培胶体硒(硒标法)3代抗体检测试剂同时进行复检，任一样本有反应性均进行确证试验。试剂均在有效期内使用，试验步骤严格按试剂盒说明书和实验室标准操作程序操作，结果按试剂盒说明书要求进行判断。

1.2.2HIV抗体确证试验 对2种方法复检均有反应和任一方法有反应样本进行确证试验，常用的确证试验有WB和RIBA/LIA。所用试剂均在有效期内，试验步骤严格按试剂盒说明书和实验室标准操作程序操作，结果按《全国艾滋病检测技术规范》(2015年修订版)要求并结合试剂盒说明书进行判断。

1.3统计学处理 应用Excel2007软件建立数据库，应用SPSS19.0统计软件进行数据分析，计数资料以率或构成比表示，采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1检测结果 有反应性4 754份样本中无患者个人信息253份、既往感染者112份，故对4 389份样本进行确证，其中确证阳性4 227份(WB：2 509份，RIBA：1 718份)，不确定87份，阴性75份。见表1。

表1 2017-2019年HIV复检有反应样本确证试验结果

2.2确证阳性样本性别分布 4 227份样本中男3 464例(81.95%)，女763例(18.05%)，男女比例为4.54∶1。不同性别样本WB、RIBA阳性检出率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 确证阳性样本性别分布

2.3确证阳性样本年龄分布 4 227份样本患者年龄主要分布在20～<30、≥60岁，分别占25.05%、23.33%。各年龄段样本WB、RIBA阳性检出率比较，差异无统计学意义(χ2=1.157，P>0.05)。见图1。

图1 HIV确证阳性样本年龄分布

2.4确证阳性样本来源分布 4 389份样本中WB检测2 601份，RIBA检测1 788份；门诊和住院患者、男男性行为、自愿咨询检测占比均较高，WB分别为40.48%、27.64%、23.88%，RIBA分别为42.23%、26.45%、25.84%；其余来源占比均较低。见表3。

表3 确证阳性样本来源分布

2.5确证阳性样本WB、RIBA各条带阳性率比较 WB检测结果中gp160阳性率最高(100.00%)，RIBA检测结果中gp41阳性率最高(100.00%)。见表4。

表4 确证阳性样本WB、RIBA各条带阳性率比较

2.6不确定样本带型分布 87份样本中单一条带gp160、gp41、p24阳性率分别为28.74%、20.69%、6.90%。gp120.gp160阳性率为3.45%，p24.gp160阳性率为32.18%。见表5。

表5 不确定样本带型分布

2.7不确定样本首次确证带型转阳情况 87份样本中追踪到55份样本转阳，其中第1次确证结果出现gp160、p24、gp41转阳率分别为70.91%、45.45%、20.00%。见表6。

表6 转阳样本首次确证带型阳转情况(n=55)

3 讨 论

重庆市2017-2019年送检的9 010份抗体筛查有反应样本经复查有反应率为52.76%(4 754/9 010)，阳性率低于相关文献报道(62.19%)[2]，与重庆市艾滋病防治工作的大力宣传贯彻密切相关。在查重和个人自愿确证条件下对4 389份有反应样本进行了确证试验，阳性4 227份(96.31%)，不确定87份(1.98%)，阴性75份(1.71%)，确证阳性率与罗小莉等[2]报道相近(92.81%)。

确证阳性样本中男性多于女性，男女比例(4.5∶1)高于全国平均水平(3.2∶1)[3]，可能与重庆市早期以吸毒传播，近期以男男性行为感染者较多有关。确证阳性样本主要分布在20～<30岁人群中,其次大于或等于60岁人群。提示感染者以青年和老年人为主，可能与重庆市男男性行为人群规模较大、感染率较高有关，随着社交方式的便利化，发生无保护性行为居高不下。≥60岁老年人群也占有较高的比例，说明该人群仍有活跃的性需求。提示不仅要着重加强对青年人群开展健康教育与干预，对大于或等于60岁老年群体也要进行相应的性安全教育宣传、避孕套的推广使用和采取其他相关的干预措施[4-5]。

本研究涉及的筛查实验室有医疗机构、疾控中心和性病门诊检测点。其中门诊和住院患者样本主要来自医疗机构，自愿咨询检测人群样本主要来源于疾控中心，男男性行为样本一般来自非政府组织和性病门诊检测点。本研究结果显示，筛查有反应性样本主要以门诊和住院患者为主，其次为男男性行为和自愿咨询检测人群，而性工作者和非商非固异性性行为者占比较低，可能与社会、道德等因素有关，促使性工作者和非商非固异性性行为这类比较隐蔽的人归类于自愿咨询检测中[6]。

在2014年联合国艾滋病规划署提出的“2020年实现3个90%，2030年终结艾滋病的流行”[7-8]的防治目标下，重庆市各检测、监测机构加大了对各人群进行艾滋病筛查的力度。本研究HIV感染者主要来源于医疗机构，说明医疗系统仍为重庆市最有效的检测监测系统，与相关研究结果相符[9-10]。

本研究使用了2种方法进行确证实验，分别对2种方法确证阳性样本进行了条带分析。结果显示，WB检测结果中3组带型以膜蛋白基因带型检出率最高(>98.00%)，与王万海等[11]研究结果一致，核衣壳蛋白基因带型中各带差异较大，检出率最高的是p24，而p55、p39检出率较低，与WANG等[12]研究结论相似。RIBA检测结果中检出率最高的是gp41，而p17及2型带gp105、gp36检出率均较低。可能与HIV-2在我国未流行有关，但2017年湖南有当地HIV-2非输入性流行病例的报道[13]。因此，对HIV-2的检测也应高度重视。

在87份不确定样本中随访追踪到55份样本转阳，其首次检测结果中gp160、p24、gp41转阳率均较高，与谢思燕等[14]研究结果一致，说明这些抗体在患者体内出现较早，对后期防控工作具有一定的提示作用。同时也提示重庆市不确定样本大多数是处于窗口期或晚期患者，由于窗口期和晚期患者具有较高的病毒载量，其传播风险也较高[15]。因此，应加大不确定样本的随访和追踪检测。

确证阳性结果常用于为早诊断、早治疗提供依据，要求患者及时进行抗病毒治疗，以降低病毒在体内的增长，提高其生活质量，延长患者寿命，尤为重要的是对确证结果为不确定或阴性样本的分析，需进一步进行核酸检测，对HIV窗口期或晚期患者采取相应的防治措施具有极其重要的意义。

综上所述，艾滋病筛查机构送检样本阳性率较高，确证率高，人群分布广泛，青壮年人群性行为活跃，应对该人群加大行为干预和检测力度，争取做到早预防、早发现、早诊断、早治疗。