王金辉 徐勇军 苏玉萍 陈祖湘

厦门市儿童医院检验科，福建厦门 361006

呼吸道感染是儿科最常见的疾病之一，其中病毒是引起儿童呼吸道疾病常见的病原体。呼吸道病毒主要包括呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADA）、流感A型病毒（FA）、流感B型病毒（FB）、副流感Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒（PIV1、2、3）[1]。儿童上呼吸道感染如果不及时治疗，可发展为气管炎、支气管炎等下呼吸道感染，并伴有严重的并发症[2]。不同的呼吸道病毒可以引起相似的临床症状，但所引起的疾病和预后是不同的，因此呼吸道病毒感染初期应得到广泛重视[3]。病毒抗原侵入呼吸道上皮细胞后复制增殖，在疾病的早期通过抗原的检测可以对呼吸道脱落上皮细胞进行抗原检测，确定病毒种类，为临床的早期诊断提供依据[4]。本研究就我院2019年3月至2020年2月呼吸道病毒感染病原构成和流行病学进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2019年3月至2020年2月来我院就诊的呼吸道感染患儿的咽拭子标本12 394例，其中男7365例（59.4%），女5029例（40.6%）。按年龄段数据分成以下组别：婴儿组（0～＜1岁）、幼儿组（1～＜3岁）、学龄前组（3～＜7岁）、学龄组（7～14岁）。

1.2 方法

1.2.1 试剂与仪器 七项呼吸道病毒检测试剂盒（D3 Ultra DFA Respiratory Virus Screening &ID kit）购自美国Diagnostic Hybrids公司；荧光显微镜（莱卡公司）；涡旋振荡器。

1.2.2 样本采集和处理 采集患儿鼻咽分泌物，采集后放置于病毒采集管中。涡旋后吹打成黏液，2000 r离心5 min，加入2 ml磷酸盐缓冲液洗涤，混合均匀后离心，弃上清，溶于0.5 ml PBS中，制成悬液。

1.2.3 直接免疫荧光法 分别吸取25 μl细胞悬液，滴入8孔板中，干燥后固定。按照试剂盒说明书计入TITC标记的荧光抗体，放置20 min后封片待检。

1.2.4 检测标准 使用荧光显微镜观察，显示绿色荧光为抗原阳性细胞，红色荧光为抗原阴性细胞。通常细胞内荧光信号≥2个判断为阳性，否则为阴性。

1.3 统计学处理

使用SPSS 19.0统计学软件进行统计分析，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同种类病毒感染阳性率的检出情况

本实验共分析12 394例患儿的咽拭子，其中2161例阳性标本，标本阳性率为17.4%，包含2389次阳性结果。单项病毒感染检出1962例，混合病毒感染检出199例，其中185例标本检出两种病毒混合感染，14例标本报告三种及以上病毒感染。RSV感染的比例最高，占44.87%；其次是ADA，占30.81%；其他五项感染的比例低。ADA和RSV组与其他组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。不同种类病毒检出情况见表1。

表1 七项病毒感染阳性率检出情况

2.2 不同年龄段患儿呼吸道病毒感染检出情况

按照基本资料中的年龄段进行分组，其中幼儿组RSV的检出率最高，占80.41%；学龄前组ADA的检出率最高，占39.27%；已检出病毒阳性患儿的年龄分布比例中，幼儿期检出阳性率最高（67.48%），与其他组别比较差异有统计学意义（P＜0.05）。七种病毒检出的情况见表2。

表2 不同年龄段患儿呼吸道病毒感染检出情况[n（%）]

2.3 2019年3月至2020年2月患儿病毒检出情况

2019年3月至2020年2月，6—8月ADA的比例最高，占总检出率的64.97%，与其他组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；而其他时间段感染均以RSV为主，尤其秋冬春季。不同季节病毒检出的情况见表3。

表3 2019年3月至2020年2月病毒检出情况[n（%）]

3 讨论

呼吸道感染是儿科最常见的疾病之一，病毒是引起儿童呼吸道感染最常见的病原体[5]。本研究回顾2019年3月至2020年2月我院患儿呼吸道病毒检出的情况。这一期间的标本病毒检出率是17.4%，共有2389次阳性结果。本研究中选择使用直接荧光免疫抗原检测方法，也是目前国内外儿科病毒诊断的首选方法[6]。通过单克隆荧光抗体标记呼吸道脱落细胞内的病毒抗原相结合，其敏感性达到98%，特异性达到86%，是稳定可靠的方法，符合临床需求[7]。本研究中病毒阳性率略低于国内其他文献的报道[8]，这应该与地域气温偏高有关系。厦门纬度低，同期气温高于大部分地区，因此呼吸道病毒的发生率略低于国内平均水平。

在2389例阳性病毒感染例数中，RSV和ADA的检出比例最高，占总阳性数的45.16%和31.00%。在婴幼儿时期，RSV的检出比例均明显高于其他种类病毒，这与国外的报道相一致[9]。RSV的感染率很高，大多数的幼儿至少经历过一次感染，这与婴幼儿期呼吸道发育不完善和免疫功能低有关[10]。婴儿期由于接触外界机会少，随着生长发育至幼儿期，活动范围和接触外界机会增多，但此时的免疫系统还不完善，因此幼儿期检出病毒感染的比例最高。随着年龄的增长，呼吸系统和免疫系统都得到提高，各种病毒感染的比例也发生了变化[11-12]。

据本研究结果分析，呼吸道病原呈现随季节变化的流行趋势。秋冬季气温较低，冷热变化交替，RSV发生率高，占75.14%；夏季ADA感染多见，占64.97%。RSV感染可表现为严重的肺部炎症和介导气道重构，因此，准确识别感染病原的种类，有助于临床医生制订正确的诊断和治疗方案[13]。

儿童呼吸道病毒感染的临床表现多样，从轻微的、自限的上呼吸道感染到严重的甚至致死性的下呼吸道感染[14]。通过呼吸道病毒检测可以及时有效地对病毒的种类及流行趋势进行监测，观察病情，指导用药，尤其对婴幼儿急性呼吸道感染的治疗提供依据。儿童呼吸道感染的流行季节性明显，往往会在一段时间造成区域流行[15]。因此准确识别感染源，制订恰当的治疗方案和应对突发的流行趋势，是儿科医务工作者急需关注的实际问题。

综上所述，儿童呼吸道感染以呼吸道合胞病毒和腺病毒感染常见；掌握病毒感染的年龄特点和季节特点为临床早期诊断、合理用药及预防并发症有重要意义。