南芥菜花叶病毒衣壳蛋白的克隆、原核表达和多克隆抗体制备
2021-07-16苏学思张玉宝王亚军郭志鸿唐国亮
苏学思,张玉宝,王亚军,郭志鸿,邱 阳,唐国亮
(1.中国科学院 西北生态环境资源研究院,兰州 730000;2.中国科学院大学,北京 100049;3.甘肃省生态与农业综合试验野外科学观测研究站,兰州 730000)
南芥菜花叶病毒(Arabismosaicvirus,ArMV)属于伴生豇豆病毒科(Secoviridae)豇豆花叶病毒亚科(Comoviridae)线虫传多面体病毒属(Nepovirus)成员,是危害花卉、果树、蔬菜等经济作物的主要病原,是列入中国进境检疫名录的二类植物病毒[1]。ArMV病毒颗粒呈正二十面体结构,基因组由两条正义单链RNA组成,编码两个开放阅读框(Open reading frame,ORF)[2]。ORF1由2 284个氨基酸多肽组成,编码一个多聚蛋白,经蛋白酶剪切后共形成6个成熟的蛋白,分别为X1,X2,NTB,VPg,Pro,Pol[3]。ORF2包含有1 083个氨基酸多肽,也编码一个多聚蛋白,剪切后形成病毒的归巢蛋白(Homing protein,HP)、运动蛋白(Movement protein,MP)和衣壳蛋白(Coat protein,CP)[4]。
ArMV寄主广泛,可以侵染约174属215种植物,其中如烟草、草莓、葡萄、大豆、番茄等皆为中国广泛种植的重要经济作物[5]。ArMV所引起的病毒病症状主要表现为叶片花叶、斑驳、黄化,严重则表现为矮化、畸形、坏死等,显著降低作物的产量和品质[6]。百合(Lilium)是一种集观赏、食用和药用价值于一体的重要经济作物,近年来被发现是ArMV的新寄主[7-8]。百合感染ArMV后,除叶片和植株表现出上述症状外,种球部位还会出现坏死斑[9]。即便寄主相同,症状也会随着株系、栽培品种、季节以及年份不同而发生变化。
为了有效控制ArMV的危害,并且制定出准确、高效的防治策略,迫切需要开发出快速高效的病毒检测技术。血清学方法因为特异性强、灵敏度高、检测速度快、大样本检测等优点,被作为田间最常用的病毒检测方法[10]。……
