西瓜 PIP5K基因家族鉴定及其在雄性不育花蕾中的表达分析
2021-07-16张高原魏兵强
张高原,丁 谦,魏兵强
(1.甘肃农业大学 园艺学院,兰州 730070;2.潍坊工程职业学院 花卉学院,山东青州 262500)
磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶(PIP5K)是磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI)信号转导途径中的关键酶,在多种细胞的功能发挥方面起着重要调控作用[1]。大多数PIP5K蛋白的N端具有多个MORN(Membrane Occupation and Recognition Nexus)结构域,C端具有1个起催化功能的PIPKc结构域,这些结构域在真核生物中高度保守[2-3]。研究表明,PIP5K基因对植物的多个组织器官的发育起调控作用,如气孔[4]、根[5-7]、花[8-11]等;此外,还参与调控植物逆境胁迫响应,如盐害[12]、水分胁迫[13]等。目前,在拟南芥(Arabidopsisthaliana)、水稻(Oryzasativa)、银杏(Ginkgobiloba)和大豆(Glycinemax)中分别发现11、11、7和22个PIP5K基因[14],部分基因已被克隆。
虽然西瓜基因组数据已公布[15],但是关于西瓜PIP5K基因的鉴定及其在雄性不育花蕾中的表达分析未见相关报道。本试验拟利用生物信息学方法对西瓜PIP5K基因进行筛选和鉴定,并对其蛋白理化性质、结构域、基因结构、motif分布、染色体定位、进化树、共线性、顺式作用元件等特征以及组织表达模式进行分析,以期为进一步研究其功能奠定前期基础。
1 材料与方法
1.1 西瓜花蕾材料
西瓜雄性两用系中可育系‘MF-1’和不育系‘MS-1’种子均由甘肃农业大学瓜类研究所提供。种子于2020年4月22日播种于兰州市皋兰县忠和镇实试验田,于7月8日分别采取雄性可育株和不育株的子蔓茎尖花蕾(长度为3~5 mm)和茎尖下方4~5节处花蕾(长度为7~9 mm),每种花蕾至少采集30个,储存在液氮中保存,备用。
1.2 西瓜PIP5K家族成员的获取
首先从西瓜基因组数据库(ftp://cucurbitgenomics.org/pub/cucurbit/genome/ watermelon/97103/v1/)[15]下载蛋白组和基因组序列,其次利用……
