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兔源F型多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立

2021-07-16王锦祥孙世坤陈岩峰陈冬金谢喜平

福建农业学报 2021年5期
关键词:检测方法

王锦祥,孙世坤,陈岩峰,陈冬金,桑 雷,谢喜平

(福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建 福州 350013)

0 引言

【研究意义】兔巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌感染兔引起的一种传染病。该病一年四季均可发生,且所有日龄的兔均可发病。临床上,兔巴氏杆菌病以呼吸道症状多见,也可见中耳炎和结膜炎[1−2]。该病是兔的常发病和多发病,是危害兔产业发展的重要疾病。根据多杀性巴氏杆菌的荚膜抗原可将其分为5种血清型,即A、B、D、E和F型[3]。其中,A和D型菌株是兔群中的优势流行菌株[4−5]。【前人研究进展】F型多杀性巴氏杆菌最早在美国的火鸡中发现[6],该菌株主要感染禽类[7],其感染能引起禽霍乱[8]。然而,研究表明国内外兔群中也存在F型多杀性巴氏杆菌,且该菌株对兔具有强致病性[9−11]。由此可见,兔群中F型多杀性巴氏杆菌的出现,使兔巴氏杆菌病的病因更加复杂,也使该病的确诊更加困难。因此,实现对F型多杀性巴氏杆菌的快速检测,掌握其在兔群中的流行情况,对兔产业的发展具有重要意义。【本研究切入点】目前,用于F型多杀性巴氏杆菌的实验室检测方法有细菌分离鉴定和多重PCR[3,10]。多杀性巴氏杆菌营养需求高、生长较缓慢,容易受其他生长较快的细菌污染。多重PCR用于多杀性巴氏杆菌的荚膜分型[3],反应体系中包含6对引物,对反应体系的组成和反应条件都要求很高,否则会出现非特异性扩增或假阴性结果。【拟解决的关键问题】为了建立一种快速且简便的F型多杀性……

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